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UM-UC-3
Gewebe
Harnblase
Krankheit
Harnblasenkarzinom
Synonyme
UMUC-3, UM-UC3, UMUC3, UC-3, University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3

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UM-UC-3

Cell line · Artikelnummer 305074

The UM-UC-3 cell line is derived from a human bladder carcinoma, specifically a high-grade transitional cell carcinoma (TCC), established from a male pati...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie UM-UC-3 stammt von einem menschlichen Blasenkarzinom, insbesondere einem hochgradigen Übergangszellkarzinom (TCC), das von einem männlichen Patienten stammt. Aufgrund ihrer robusten Wachstumseigenschaften, sowohl in vitro als auch in vivo, wurde sie in der Krebsforschung häufig verwendet. UM-UC-3-Zellen weisen eine epitheliale Morphologie auf und sind aneuploid, mit einer modalen Chromosomenzahl zwischen 59 und 95. Diese Zellen sind in der Lage, in immungeschwächten Mäusen Tumore zu bilden, deren histologische Merkmale denen des Primärtumors ähneln, was ihren Nutzen als präklinisches Modell für Blasenkrebs unterstreicht.

Genetische und molekulare Studien haben signifikante Veränderungen in UM-UC-3-Zellen ergeben, darunter häufige Deletionen und Mutationen in wichtigen Tumorsuppressorgenen wie CDKN2A und CDKN2B. Diese Gene befinden sich in der Region 9p21, die bei Blasenkrebs häufig deletiert ist, was zu einer Dysregulierung des Zellzyklus beiträgt. Darüber hinaus weist UM-UC-3 Veränderungen im Phosphatidylinositol-3-Kinase (PI3K)-Signalweg auf, einem entscheidenden Faktor für die Tumorentstehung bei Urothelkarzinomen. Diese Eigenschaften machen sie zu einem wertvollen Modell für die Untersuchung onkogener Signalwege und die Erprobung gezielter Therapien.

UM-UC-3-Zellen wurden in der therapeutischen Forschung ausgiebig eingesetzt, insbesondere zur Untersuchung der Wirkung von Inhibitoren, die auf die PI3K/AKT- und MAPK-Signalwege abzielen. Sie werden auch in Arzneimittel-Screening-Programmen eingesetzt, um Substanzen zu identifizieren, die gegen Blasenkrebs wirksam sind. Die genetische und phänotypische Stabilität der Zelllinie über mehrere Passagen hinweg unterstreicht ihre Rolle als zuverlässiges Forschungsinstrument in der Krebsbiologie und der therapeutischen Entwicklung.

Gewebe
Harnblase
Krankheit
Harnblasenkarzinom
Synonyme
  • UMUC-3
  • UM-UC3
  • UMUC3
  • UC-3
  • University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial
Tumorauslösend
Ja

04Bezeichner

Quellenangabe
UM-UC-3 (Cytion-Katalognummer 305074)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1783

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
Alter nicht spezifiziert
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch