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UM-UC-3
Tecido
Bexiga urinária
Doença
Carcinoma da bexiga
Sinónimos
UMUC-3, UM-UC3, UMUC3, UC-3, University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3

Documentos

UM-UC-3

Cell line · Número do produto 305074

The UM-UC-3 cell line is derived from a human bladder carcinoma, specifically a high-grade transitional cell carcinoma (TCC), established from a male pati...

€430.00sem impostos nem portes de envio

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular UM-UC-3 é derivada de um carcinoma da bexiga humana, especificamente um carcinoma de células de transição de alto grau (TCC), estabelecido a partir de um doente do sexo masculino. Tem sido amplamente utilizada na investigação do cancro devido às suas caraterísticas de crescimento robustas, tanto in vitro como in vivo. As células UM-UC-3 apresentam uma morfologia epitelial e são aneuplóides, com um número modal de cromossomas que varia entre 59 e 95. Estas células são capazes de formar tumores em ratinhos imunocomprometidos, com caraterísticas histológicas semelhantes às do tumor primário, o que realça a sua utilidade como modelo pré-clínico do cancro da bexiga.

Os estudos genéticos e moleculares revelaram alterações significativas nas células UM-UC-3, incluindo deleções e mutações frequentes em genes supressores de tumores essenciais, como o CDKN2A e o CDKN2B. Estes genes estão localizados na região 9p21, que é frequentemente eliminada no cancro da bexiga, contribuindo para a desregulação do ciclo celular. Além disso, o UM-UC-3 apresenta alterações na via de sinalização da fosfatidilinositol 3-quinase (PI3K), um fator crítico de tumorigénese no carcinoma urotelial. Estas caraterísticas tornam-na um modelo valioso para o estudo das vias de sinalização oncogénica e para o ensaio de terapias específicas.

As células UM-UC-3 têm sido amplamente utilizadas na investigação terapêutica, nomeadamente na exploração dos efeitos dos inibidores que visam as vias de sinalização PI3K/AKT e MAPK. São também utilizadas em programas de rastreio de medicamentos para identificar compostos eficazes contra o cancro da bexiga. A estabilidade genética e fenotípica da linha celular ao longo de múltiplas passagens apoia ainda mais o seu papel como ferramenta de investigação fiável na biologia do cancro e no desenvolvimento terapêutico.

Tecido
Bexiga urinária
Doença
Carcinoma da bexiga
Sinónimos
  • UMUC-3
  • UM-UC3
  • UMUC3
  • UC-3
  • University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tumorigénico
Sim

04Identificadores

Referência
UM-UC-3 (número de catálogo Cytion 305074)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1783

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS e 1% de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
Idade não especificada
Etnia
Europeu