Przejdź do treści
Chusteczka
Podniebienie twarde, gruczoł ślinowy
Choroba
Rak śluzowo-naskórkowy podniebienia twardego
Miejsce przerzutów
Lokalizacja guza pierwotnego (podniebienie twarde)
Synonimy
University of Michigan-Human Mucoepidermoid Carcinoma-3B

Dokumenty

UM-HMC-3B

Cell line · Numer produktu 305715

€0.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
1

01Informacje ogólne

Opis

UM-HMC-3B to ludzka linia komórkowa raka śluzowo-naskórkowego, wyhodowana z pierwotnego raka śluzowo-naskórkowego gruczołów ślinowych podniebienia twardego u 73-letniej pacjentki rasy kaukaskiej. Linia ta wchodzi w skład panelu ludzkich raków śluzowo-naskórkowych Uniwersytetu Michigan (UM-HMC). Podobnie jak UM-HMC-1, linia UM-HMC-3B zawiera fuzję genów CRTC1-MAML2 (MECT1-MAML2), która jest czynnikiem onkogennym w większości przypadków raka śluzowo-naskórkowego i wynika z translokacji t(11;19)(q21;p13) i powoduje aktywację szlaków CREB oraz Notch.

UM-HMC-3B ma zastosowanie w badaniach nad biologią raka śluzowo-naskórkowego podniebienia twardego i gruczołów ślinowych, sygnalizacją CRTC1-MAML2 oraz w analizach porównawczych z innymi liniami z panelu UM-HMC. Wraz z linią UM-HMC-1 i innymi liniami z panelu UM-HMC-3B umożliwia identyfikację wspólnych i rozbieżnych cech molekularnych w rakach śluzowo-naskórkowych występujących w różnych lokalizacjach anatomicznych, u osób w różnym wieku i obu płci. Nadaje się również do badań wrażliwości na leki ukierunkowanych na onkoproteiny fuzyjne oraz dalsze efektorowe cząsteczki szlaków CREB/Notch.

Chusteczka
Podniebienie twarde, gruczoł ślinowy
Choroba
Rak śluzowo-naskórkowy podniebienia twardego
Miejsce przerzutów
Lokalizacja guza pierwotnego (podniebienie twarde)
Zastosowania
Badania nad rakiem gruczołów ślinowych; biologia fuzji CRTC1-MAML2; biologia MEC podniebienia twardego; szlak CREB/Notch; porównawcze badania panelowe UM-HMC; testy wrażliwości na leki
Synonimy
  • University of Michigan-Human Mucoepidermoid Carcinoma-3B

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
Bez GMO
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
No genetic modification; somatic CRTC1-MAML2 fusion acquired during tumor development
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Typ komórki
Komórki nabłonkowe
Czas podwojenia
ok. 24–48 godzin

04Identyfikatory

Źródło
UM-HMC-3B (numer katalogowy Cytion 305715)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_Y472

05Ekspresja i podatność

Profil mutacji
Mutacja: Fuzja genów, CRTC1 + HGNC, MAML2, Nazwa(-y)=CRTC1-MAML2, MECT1-MAML2.

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usunąć pożywkę, przemyć komórki roztworem PBS bez wapnia i magnezu, zalać preparatem Accutase, inkubować przez 8–10 minut w temperaturze pokojowej, zawiesić komórki w pożywce, odwirować przy 300×g przez 3 minuty, odrzucić supernatant, ponownie zasiać komórki w świeżej pożywce.
Współczynnik podziału
od 1 do 5
Gęstość wysiewu
2–4 × 10⁴/cm²
Odnawianie płynów
Co 2 do 3 dni
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
73 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski