Mine otse sisu juurde
Kude
Kõva suulae, süljenääre
Haigus
Kõva suulae mukoepidermoidne kartsinoom
Metastaaside asukoht
Esmane kasvaja asukoht (kõva suulae)
Sünonüümid
University of Michigan-Human Mucoepidermoid Carcinoma-3B

Dokumendid

UM-HMC-3B

Cell line · Toote number 305715

€0.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
1

01Üldine teave

Kirjeldus

UM-HMC-3B on inimese mukoepidermoidse kartsinoomi rakuliin, mis on saadud 73-aastase kaukaasia päritolu naispatsiendi kõva suulae süljenäärmete primaarsest mukoepidermoidsest kartsinoomist. See liin kuulub Michigani Ülikooli inimese mukoepidermoidkartsinoomi (UM-HMC) paneeli. Nagu UM-HMC-1, sisaldab ka UM-HMC-3B CRTC1-MAML2 geenifusiooni (MECT1-MAML2), mis on enamiku mukoepidermoidsete kartsinoomide onkogeenne ajur, mis tuleneb t(11;19)(q21;p13) translokatsioonist ning ajendab CREB-i ja Notch-signaalitee aktiveerimist.

UM-HMC-3B sobib kõva suulae ja süljenäärmete mukoepidermoidkartsinoomi bioloogia uurimiseks, CRTC1-MAML2 signaalimise uurimiseks ning võrdlevateks analüüsideks teiste UM-HMC paneeli liinidega. Koos UM-HMC-1 ja teiste paneeli liikmetega võimaldab UM-HMC-3B tuvastada ühiseid ja erinevaid molekulaarseid omadusi erinevate anatoomiliste asukohtade, vanuserühmade ja sugude mukoepidermoidsete kartsinoomide puhul. See sobib ka ravimite tundlikkuse määramiseks, mis on suunatud fusioon-onkoproteiinidele ja nendest allavoolu asuvatele CREB/Notch-efektoritele.

Kude
Kõva suulae, süljenääre
Haigus
Kõva suulae mukoepidermoidne kartsinoom
Metastaaside asukoht
Esmane kasvaja asukoht (kõva suulae)
Rakendused
Süljenäärme kartsinoomi uurimine; CRTC1-MAML2-fusioonide bioloogia; kõva suulae MEC-i bioloogia; CREB/Notch-signaalitee; võrdlevad UM-HMC-paneeluuringud; ravimite tundlikkuse testid
Sünonüümid
  • University of Michigan-Human Mucoepidermoid Carcinoma-3B

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-vaba
GMO-staatuse üksikasjad
No genetic modification; somatic CRTC1-MAML2 fusion acquired during tumor development
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epiteelirakud
Kahekordistumisaeg
umbes 24–48 tundi

04Tunnused

Viide
UM-HMC-3B (Cytioni katalooginumber 305715)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_Y472

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: geenifusioon, CRTC1 + HGNC, MAML2, nimetus(ed)=CRTC1-MAML2, MECT1-MAML2.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kasvukeskkond, peske PBS-ga, milles ei ole kaltsiumi ega magneesiumi, katke Accutase’iga, inkubeerige 8–10 minutit toatemperatuuril, suspendeerige uuesti kasvukeskkonnas, tsentrifuugige 300×g 3 minutit, valage supernatant ära, külvake uuesti värskesse kasvukeskkonda.
Jagamissuhe
1–5
Külvitihedus
2–4 × 10⁴/cm²
Vedeliku vahetus
Iga 2 kuni 3 päeva tagant
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
73 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia