Siirry sisältöön
Kudos
Kova kitalaki, sylkirauhanen
Sairaus
Kova kitalaen mukoepidermoidinen karsinooma
Metastaasikohde
Ensisijainen kasvaimen sijainti (kova suulaki)
Synonyymit
University of Michigan-Human Mucoepidermoid Carcinoma-3B

Asiakirjat

UM-HMC-3B

Cell line · Tuotenumero 305715

€0.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

UM-HMC-3B on ihmisen mukoepidermoidisen karsinooman solulinja, joka on peräisin 73-vuotiaan valkoihoisen naispotilaan kovan kitalaen sylkirauhasista löydetystä primaarisesta mukoepidermoidisesta karsinoomasta. Kantakudos kuuluu Michiganin yliopiston ihmisen mukoepidermoidisen karsinooman (UM-HMC) paneeliin. Kuten UM-HMC-1, myös UM-HMC-3B:ssä esiintyy CRTC1-MAML2-geenifuusio (MECT1-MAML2), joka on useimpien mukoepidermoidisten karsinoomien syöpää aiheuttava tekijä ja joka johtuu t(11;19)(q21;p13)-translokaatiosta ja joka aktivoi CREB- ja Notch-signalointireittejä.

UM-HMC-3B soveltuu kovakitalaen ja sylkirauhasen mukoepidermoidisen karsinooman biologian tutkimukseen, CRTC1-MAML2-signaloinnin tutkimukseen sekä vertailuanalyyseihin muiden UM-HMC-paneelin linjojen kanssa. Yhdessä UM-HMC-1:n ja muiden paneelin jäsenten kanssa UM-HMC-3B mahdollistaa yhteisten ja eroavien molekyylisten piirteiden tunnistamisen mukoepidermoidisten karsinoomien välillä eri anatomisissa paikoissa, ikäryhmissä ja sukupuolten välillä. Se soveltuu myös lääkeherkkyystesteihin, jotka kohdistuvat fuusioituneisiin onkoproteiineihin ja niiden alavirran CREB/Notch-efektoreihin.

Kudos
Kova kitalaki, sylkirauhanen
Sairaus
Kova kitalaen mukoepidermoidinen karsinooma
Metastaasikohde
Ensisijainen kasvaimen sijainti (kova suulaki)
Sovellukset
Sylkirauhasen karsinooman tutkimus; CRTC1-MAML2-fuusion biologia; kovakitalaen MEC:n biologia; CREB/Notch-signaalireitti; vertailevat UM-HMC-paneelitutkimukset; lääkeherkkyystestit
Synonyymit
  • University of Michigan-Human Mucoepidermoid Carcinoma-3B

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-vapaa
GMO-statuksen tiedot
No genetic modification; somatic CRTC1-MAML2 fusion acquired during tumor development
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteelisolut
Kaksinkertaistumisaika
noin 24–48 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
UM-HMC-3B (Cytionin tuotenumero 305715)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_Y472

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Mutaatio: Geenifuusio, CRTC1 + HGNC, MAML2, Nimi(t)=CRTC1-MAML2, MECT1-MAML2.

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista elatusaine, pese PBS-liuoksella, josta on poistettu kalsium ja magnesium, lisää Accutasea, inkuboi 8–10 minuuttia huoneenlämmössä, suspendoi uudelleen elatusaineeseen, sentrifugoi 300×g:ssa 3 minuuttia, heitä supernatantti pois ja siirrä solut uuteen elatusaineeseen.
Jakosuhde
1–5
Kylvötiheys
2–4 × 10⁴/cm²
Nesteen uusiminen
2-3 päivän välein
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
73 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen