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Tecido
Palato duro, glândula salivar
Doença
Carcinoma mucoepidermoide do palato duro
Local da metástase
Localização do tumor primário (palato duro)
Sinónimos
University of Michigan-Human Mucoepidermoid Carcinoma-3B

Documentos

UM-HMC-3B

Cell line · Número do produto 305715

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01Informações gerais

Descrição

A UM-HMC-3B é uma linha celular de carcinoma mucoepidermoide humano estabelecida a partir de um carcinoma mucoepidermoide primário das glândulas salivares do palato duro de uma doente caucasiana de 73 anos. Esta linha faz parte do painel de carcinomas mucoepidermoides humanos da Universidade de Michigan (UM-HMC). Tal como a UM-HMC-1, a UM-HMC-3B apresenta a fusão génica CRTC1-MAML2 (MECT1-MAML2), o fator oncogénico responsável pela maioria dos carcinomas mucoepidermoides, que resulta de umatranslocação (11;19)(q21;p13) e impulsiona a ativação das vias CREB e Notch.

A UM-HMC-3B é aplicável em estudos sobre a biologia do carcinoma mucoepidermoide do palato duro e das glândulas salivares, a sinalização CRTC1-MAML2 e análises comparativas com outras linhas do painel UM-HMC. Juntamente com a UM-HMC-1 e outros membros do painel, a UM-HMC-3B permite a identificação de características moleculares comuns e divergentes em carcinomas mucoepidermoides de diferentes localizações anatómicas, idades e sexos. É também adequada para ensaios de sensibilidade a fármacos direcionados para oncoproteínas de fusão e efetores a jusante das vias CREB/Notch.

Tecido
Palato duro, glândula salivar
Doença
Carcinoma mucoepidermoide do palato duro
Local da metástase
Localização do tumor primário (palato duro)
Aplicações
Investigação sobre o carcinoma das glândulas salivares; biologia da fusão CRTC1-MAML2; biologia do carcinoma epitelial maligno (MEC) do palato duro; via CREB/Notch; estudos comparativos de painéis da UM-HMC; ensaios de sensibilidade a fármacos
Sinónimos
  • University of Michigan-Human Mucoepidermoid Carcinoma-3B

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
Sem OGM
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
No genetic modification; somatic CRTC1-MAML2 fusion acquired during tumor development
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células epiteliais
Tempo de duplicação
aproximadamente 24 a 48 horas

04Identificadores

Referência
UM-HMC-3B (número de catálogo da Cytion 305715)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_Y472

05Expressão e suscetibilidade

Perfil mutacional
Mutação: Fusão genética, CRTC1 + HGNC, MAML2, Nome(s)=CRTC1-MAML2, MECT1-MAML2.

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio, lavar com PBS sem cálcio nem magnésio, cobrir com Accutase, incubar durante 8 a 10 minutos à temperatura ambiente, ressuspender no meio, centrifugar a 300×g durante 3 minutos, descartar o sobrenadante e repovoar em meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 5
Densidade de sementeira
2-4*10⁴/cm²
Renovação de fluidos
A cada 2 ou 3 dias
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
73 anos
Etnia
Caucasiano