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CAL-62
Gewebe
Schilddrüse
Krankheit
Anaplastisches Schilddrüsenkarzinom
Synonyme
Cal-62, CAL 62, Cal 62, CAL62, Centre Antoine Lacassagne-62

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CAL-62

Cell line · Artikelnummer 305114

The CAL-62 cell line was established from the right lobe of the thyroid gland of a 70-year-old Caucasian woman in 1988 and has been extensively used in th...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die CAL-62-Zelllinie wurde 1988 aus dem rechten Schilddrüsenlappen einer 70-jährigen kaukasischen Frau gewonnen und wird seither intensiv zur Untersuchung des anaplastischen Schilddrüsenkarzinoms eingesetzt. Diese humanen epithelähnlichen Zellen weisen ein ausgeprägtes Monolayer-Wachstumsmuster auf und zeigen ausgeprägte tumorigene Eigenschaften, was sie zu einem bedeutenden Modell für In-vivo-Untersuchungen der Progression von Schilddrüsenkrebs macht. Bei der Transplantation in immundefiziente Nacktmäuse haben CAL-62-Zellen eine robuste Fähigkeit zur Bildung von Tumoren gezeigt, was ein praktisches und effektives Modell für die Analyse der Tumordynamik und die Bewertung potenzieller therapeutischer Strategien in biologischer Echtzeitumgebung darstellt.

CAL-62 zeichnet sich durch eine schnelle Proliferationsrate mit einer Verdopplungszeit von etwa 24 Stunden aus und ermöglicht beschleunigte Forschungsergebnisse in zeitkritischen Studien, wodurch die Effizienz der experimentellen Arbeitsabläufe in der Krebsforschung verbessert wird. Die genetische Charakterisierung dieser Zelllinie zeigt das Vorhandensein der KRAS p.G12R-Mutation und Veränderungen am 9p21.3-Lokus, was auf komplexe genetische Grundlagen im Zusammenhang mit anaplastischen Schilddrüsenkarzinomen hinweist. Der stabile epitheliale Phänotyp und die inhärente Strahlenresistenz dieser Zelllinie unterstreichen ihre Nützlichkeit bei der Aufdeckung neuer Erkenntnisse über die Pathophysiologie aggressiver Schilddrüsenkarzinome und bei der Entwicklung neuer therapeutischer Modalitäten. Die einzigartigen Eigenschaften von CAL-62, einschließlich seiner Fähigkeit zur aggressiven Tumorbildung und seiner genetischen Marker, machen es zu einer zentralen Ressource bei den laufenden Bemühungen um ein besseres Verständnis und eine bessere Behandlung des anaplastischen Schilddrüsenkarzinoms.

Gewebe
Schilddrüse
Krankheit
Anaplastisches Schilddrüsenkarzinom
Synonyme
  • Cal-62
  • CAL 62
  • Cal 62
  • CAL62
  • Centre Antoine Lacassagne-62

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial
Verdopplungszeit
24 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
CAL-62 (Cytion Katalognummer 305114)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1112

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
70 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch