Pāriet uz saturu
CAL-62
Audums
Vairogdziedzera
Slimība
Vairogdziedzera anaplastiskā karcinoma
Sinonīmi
Cal-62, CAL 62, Cal 62, CAL62, Centre Antoine Lacassagne-62

Dokumenti

CAL-62

Cell line · Preces numurs 305114

The CAL-62 cell line was established from the right lobe of the thyroid gland of a 70-year-old Caucasian woman in 1988 and has been extensively used in th...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

CAL-62 šūnu līnija tika izveidota 1988. gadā no 70 gadus vecas baltādainas sievietes vairogdziedzera labās daivas un ir plaši izmantota vairogdziedzera anaplastiskās karcinomas pētījumos. Šīm cilvēka epitēlijveidīgajām šūnām piemīt raksturīgs vienslāņu augšanas modelis un izteiktas audzēja īpašības, tāpēc tās ir nozīmīgs modelis vairogdziedzera vēža progresēšanas in vivo pētījumiem. CAL-62 šūnas, pārstādītas imūndeficītām nude pelēm, ir pierādījušas stabilu spēju veidot audzējus, nodrošinot praktisku un efektīvu modeli audzēju dinamikas analīzei un potenciālo terapeitisko stratēģiju novērtēšanai reālā bioloģiskā laikā.

CAL-62 raksturīgs ātrs proliferācijas ātrums ar dubultošanās laiku aptuveni 24 stundas, kas ļauj paātrināt pētījumu rezultātus pētījumos, kuri ir jutīgi pret laiku, uzlabojot eksperimentālo darba procesu efektivitāti vēža pētījumos. Šīs šūnu līnijas ģenētiskā raksturošana atklāj KRAS p.G12R mutāciju un izmaiņas 9p21.3 lokusā, norādot uz sarežģītiem ģenētiskajiem pamatiem, kas saistīti ar vairogdziedzera anaplastisko karcinomu. Šīs šūnu līnijas stabilais epitēlija fenotips un raksturīgā radiorezistence vēl vairāk uzsver tās lietderību, lai atklātu jaunas atziņas par agresīva vairogdziedzera vēža patofizioloģiju un izstrādātu jaunus terapeitiskos paņēmienus. CAL-62 unikālās īpašības, tostarp tā agresīvā audzēja veidošanās spēja un ģenētiskie marķieri, padara to par galveno resursu pašreizējos centienos labāk izprast un ārstēt vairogdziedzera anaplastisko karcinomu.

Audums
Vairogdziedzera
Slimība
Vairogdziedzera anaplastiskā karcinoma
Sinonīmi
  • Cal-62
  • CAL 62
  • Cal 62
  • CAL62
  • Centre Antoine Lacassagne-62

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
24 stundas

04Identifikatori

Atsauce
CAL-62 (Cytion kataloga numurs 305114)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1112

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
70 gadi
Etniskā piederība
Eiropas