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CAL-62
Tessuto
Tiroide
Malattia
Carcinoma anaplastico della ghiandola tiroidea
Sinonimi
Cal-62, CAL 62, Cal 62, CAL62, Centre Antoine Lacassagne-62

Documenti

CAL-62

Cell line · Codice prodotto 305114

The CAL-62 cell line was established from the right lobe of the thyroid gland of a 70-year-old Caucasian woman in 1988 and has been extensively used in th...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare CAL-62 è stata ottenuta nel 1988 dal lobo destro della tiroide di una donna caucasica di 70 anni ed è stata ampiamente utilizzata nello studio del carcinoma anaplastico della tiroide. Queste cellule umane simil-epiteliali presentano un modello di crescita monostratificato distintivo e dimostrano spiccate proprietà tumorigeniche, che le rendono un modello significativo per gli studi in vivo della progressione del cancro della tiroide. Trapiantate in topi nudi immunodeficienti, le cellule CAL-62 hanno dimostrato una solida capacità di formare tumori, fornendo un modello pratico ed efficace per analizzare le dinamiche tumorali e valutare potenziali strategie terapeutiche in contesti biologici in tempo reale.

Caratterizzata da un rapido tasso di proliferazione con un tempo di raddoppio di circa 24 ore, CAL-62 consente di accelerare i risultati della ricerca in studi sensibili ai tempi, migliorando l'efficienza dei flussi di lavoro sperimentali nella ricerca sul cancro. La caratterizzazione genetica di questa linea cellulare rivela la presenza della mutazione KRAS p.G12R e di alterazioni nel locus 9p21.3, indicando una complessa base genetica associata al carcinoma anaplastico della tiroide. Il fenotipo epiteliale stabile di questa linea cellulare e l'intrinseca radioresistenza sottolineano ulteriormente la sua utilità nello scoprire nuove conoscenze sulla fisiopatologia dei tumori tiroidei aggressivi e nello sviluppo di nuove modalità terapeutiche. Le caratteristiche uniche di CAL-62, tra cui la sua capacità di formare tumori aggressivi e i suoi marcatori genetici, lo rendono una risorsa fondamentale negli sforzi in corso per comprendere e trattare meglio il carcinoma anaplastico della tiroide.

Tessuto
Tiroide
Malattia
Carcinoma anaplastico della ghiandola tiroidea
Sinonimi
  • Cal-62
  • CAL 62
  • Cal 62
  • CAL62
  • Centre Antoine Lacassagne-62

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale
Tempo di raddoppio
24 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
CAL-62 (numero di catalogo Cytion 305114)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1112

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
70 anni
Etnia
Europeo