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CT26-Luc
Gewebe
Doppelpunkt
Krankheit
Adenokarzinom des Dickdarms
Synonyme
Luciferase Reporter CT26 Cell Line

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CT26-Luc

Cell line · Artikelnummer 305646

CT26-Luc is a bioluminescent derivative of the murine CT26 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

CT26-Luc ist ein biolumineszentes Derivat der murinen CT26-Kolonadenokarzinom-Zelllinie, das so gentechnisch verändert wurde, dass es ein Firefly-Luciferase-Reportergen stabil exprimiert. Die ursprüngliche CT26-Zelllinie wurde aus einem durch N-Nitroso-N-Methylurethan induzierten undifferenzierten Kolonkarzinom einer BALB/c-Maus etabliert und ist eines der am häufigsten verwendeten syngenen Tumormodelle für die präklinische immunonkologische Forschung. CT26-Zellen weisen aggressive Wachstumseigenschaften auf, darunter eine schnelle Proliferation und ein hohes tumorigenes Potenzial in immunkompetenten BALB/c-Wirten, wodurch sie Aspekte der Biologie des menschlichen Kolorektalkarzinoms genau nachbilden.

Die stabile Integration eines Luciferase-Reporters in CT26-Luc ermöglicht eine empfindliche, quantitative biolumineszente Bildgebung (BLI) der Tumorlast bei lebenden Tieren. Nach Verabreichung des Substrats Luciferin korreliert das emittierte Lichtsignal mit der Anzahl metabolisch aktiver Tumorzellen, was eine nichtinvasive Langzeitüberwachung des Tumorwachstums, der Metastasierung und des Ansprechens auf die Behandlung ermöglicht. Dies macht CT26-Luc besonders wertvoll für präklinische Studien zur Bewertung von Checkpoint-Inhibitoren, therapeutischen Antikörpern, onkolytischen Viren und Kombinationsbehandlungsstrategien in einem immunkompetenten Umfeld.

CT26-Luc behält die wesentlichen biologischen Eigenschaften der Elternlinie CT26 bei, darunter ihre Empfindlichkeit gegenüber immunvermittelter Abtötung und ihre etablierte Verwendung in Studien zur Tumorimmunologie, adoptiven Zelltherapie und Krebsimpfstoffentwicklung. Die Einbindung des Luciferase-Reporters erhöht den experimentellen Durchsatz und die Empfindlichkeit erheblich und ermöglicht eine Echtzeit-Bewertung der therapeutischen Wirksamkeit und der Tumorkinetik im Verlauf der Behandlung, ohne dass Tiere zu einzelnen Zeitpunkten getötet werden müssen.

Gewebe
Doppelpunkt
Krankheit
Adenokarzinom des Dickdarms
Synonyme
  • Luciferase Reporter CT26 Cell Line

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Fibroblasten
Verdopplungszeit
24–48 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
CT26-Luc (Cytion-Katalognummer 305646)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_E3H3

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
Luc2 (Firefly, codonoptimiert)
Mutationsprofil
Mutation: p.Gly12Asp, homozygot

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Split-Verhältnis
1 bis 3
Aussaatdichte
1 bis 3 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir vollständiges Wachstumsmedium + 10 % DMSO, um eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen zu gewährleisten.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
BALB/c
Alter des Spenders
Alter nicht spezifiziert