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CT26-Luc
Tessuto
Colon
Malattia
Adenocarcinoma del colon
Sinonimi
Luciferase Reporter CT26 Cell Line

Documenti

CT26-Luc

Cell line · Codice prodotto 305646

CT26-Luc is a bioluminescent derivative of the murine CT26 colon adenocarcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene...

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01Informazioni generali

Descrizione

CT26-Luc è un derivato bioluminescente della linea cellulare murina CT26 di adenocarcinoma del colon, ingegnerizzata per esprimere in modo stabile un gene reporter della luciferasi di lucciola. La linea cellulare parentale CT26 è stata ottenuta da un carcinoma del colon indifferenziato indotto da N-nitroso-N-metiluretano in un topo BALB/c ed è uno dei modelli tumorali singeneici più ampiamente utilizzati per la ricerca preclinica in immuno-oncologia. Le cellule CT26 presentano caratteristiche di crescita aggressive, tra cui una rapida proliferazione e un elevato potenziale tumorigenico in ospiti BALB/c immunocompetenti, riproducendo fedelmente alcuni aspetti della biologia del cancro colorettale umano.

L’integrazione stabile di un reporter a luciferasi nella linea CT26-Luc consente un’imaging bioluminescente (BLI) sensibile e quantitativo del carico tumorale in animali vivi. A seguito della somministrazione del substrato luciferina, il segnale luminoso emesso è correlato al numero di cellule tumorali metabolicamente attive, facilitando il monitoraggio longitudinale non invasivo della crescita tumorale, della diffusione metastatica e delle risposte al trattamento. Ciò rende CT26-Luc particolarmente prezioso per gli studi preclinici volti a valutare inibitori dei checkpoint, anticorpi terapeutici, virus oncolitici e strategie di trattamento combinato in un contesto immunocompetente.

CT26-Luc conserva le caratteristiche biologiche chiave della linea parentale CT26, tra cui la sensibilità all’uccisione immuno-mediata e il suo consolidato impiego negli studi di immunologia tumorale, terapia cellulare adottiva e sviluppo di vaccini antitumorali. L’aggiunta del reporter luciferasi aumenta notevolmente la produttività e la sensibilità sperimentali, consentendo la valutazione in tempo reale dell’efficacia terapeutica e della cinetica tumorale nel corso del trattamento senza dover sacrificare gli animali in singoli momenti temporali.

Tessuto
Colon
Malattia
Adenocarcinoma del colon
Sinonimi
  • Luciferase Reporter CT26 Cell Line

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Fibroblasti
Tempo di raddoppio
24-48 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
CT26-Luc (codice catalogo Cytion 305646)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_E3H3

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
Luc2 (lucciola, ottimizzata a livello di codoni)
Profilo mutazionale
Mutazione: p.Gly12Asp, omozigote

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rapporto di frazionamento
da 1 a 3
Densità di semina
Da 1 a 3 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controllo di qualità e crioconservazione

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo + 10% DMSO per ottenere un'adeguata vitalità post-scongelamento.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
BALB/c
Età dei donatori
Età non specificata