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NCI-H226
Gewebe
Lunge
Krankheit
Epitheloides Pleuramesotheliom
Synonyme
NCI-H226, NCI.H226, NCI H226, H-226, HUT-226, HUT 226, NCIH226

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NCI-H226

Cell line · Artikelnummer 305091

The NCI-H226 cell line is derived from a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC), specifically squamous cell carcinoma, and is a robust model for stud...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die Zelllinie NCI-H226 stammt von einem menschlichen nicht-kleinzelligen Lungenkarzinom (NSCLC), insbesondere einem Plattenepithelkarzinom, und ist ein robustes Modell zur Untersuchung der Pathogenese von NSCLC und der therapeutischen Reaktionen. NCI-H226 zeichnet sich durch seine epitheliale Morphologie aus und wurde in der präklinischen Forschung mit Schwerpunkt auf Plattenepitheldifferenzierung und Apoptose ausgiebig eingesetzt. Diese Zelllinie hat entscheidend zur Aufklärung der Mechanismen der Plattenepithel-Differenzierung beigetragen, insbesondere zur Bildung von vernetzten Hüllen (CLEs) und zur Rolle der Transglutaminase-Aktivität, die beide Marker für die terminale Differenzierung sind.

Eine wichtige Erkenntnis im Zusammenhang mit NCI-H226 ist seine Reaktion auf Wirkstoffe wie Suramin, das die Differenzierung und Apoptose auslöst, ohne notwendigerweise die Zellproliferation zu hemmen. Studien haben gezeigt, dass Suramin die Expression von Involucrin stimulieren, die zytosolische Transglutaminase-Aktivität erhöhen und die CLE-Bildung unabhängig von der Proteinsynthese induzieren kann. Diese Wirkungen machen NCI-H226 zu einem idealen System für die Erforschung von Therapeutika, die sich die zellulären Differenzierungswege zunutze machen, um resistenten NSCLC zu bekämpfen.

NCI-H226 wurde auch in breiter angelegte Krebsforschungsprojekte einbezogen, wie z. B. das NCI-60-Wirkstoffscreening-Programm, das Einblicke in seine pharmakologischen Profile und seinen Nutzen für das Hochdurchsatz-Screening von Wirkstoffen bietet. Die genetische und phänotypische Stabilität dieser Zelllinie untermauert ihre Bedeutung für die Krebsforschung und die therapeutische Entwicklung.

Gewebe
Lunge
Krankheit
Epitheloides Pleuramesotheliom
Synonyme
  • NCI-H226
  • NCI.H226
  • NCI H226
  • H-226
  • HUT-226
  • HUT 226
  • NCIH226

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelial

04Bezeichner

Quellenangabe
NCI-H226 (Cytion-Katalognummer 305091)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1544

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch