Pāriet uz saturu
NCI-H226
Audums
Plaušas
Slimība
Pleiras epitēlioīdā mezotelioma
Sinonīmi
NCI-H226, NCI.H226, NCI H226, H-226, HUT-226, HUT 226, NCIH226

Dokumenti

NCI-H226

Cell line · Preces numurs 305091

The NCI-H226 cell line is derived from a human non-small cell lung carcinoma (NSCLC), specifically squamous cell carcinoma, and is a robust model for stud...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

NCI-H226 šūnu līnija ir iegūta no cilvēka plaušu karcinomas, kas nav sīkšūnu plaušu karcinoma (NSCLC), īpaši plakanšūnu karcinomas, un tā ir stabils modelis NSCLC patoģenēzes un terapeitiskās atbildes reakcijas izpētei. NCI-H226 ir raksturīga epitēlija morfoloģija, un tā ir plaši izmantota pirmsklīniskajos pētījumos, kuros galvenā uzmanība pievērsta plakanšūnu diferenciācijai un apoptozei. Šai šūnu līnijai ir bijusi izšķiroša nozīme plakanās diferenciācijas mehānismu noskaidrošanā, jo īpaši šķērssaitētu apvalku (CLE) veidošanās un transglutamināzes aktivitātes, kas ir terminālās diferenciācijas marķieri.

Viens no galvenajiem atklājumiem, kas saistīts ar NCI-H226, ir tās reakcija uz tādiem līdzekļiem kā suramīns, kas izraisa diferenciāciju un apoptozi, ne vienmēr kavējot šūnu proliferāciju. Pētījumos ir pierādīts, ka suramīns var stimulēt involukrīna ekspresiju, palielināt citosoliskās transglutamināzes aktivitāti un inducēt CLE veidošanos no proteīnu sintēzes neatkarīgā veidā. Šie efekti padara NCI-H226 par ideālu sistēmu terapeitisko līdzekļu izpētei, kas izmanto šūnu diferenciācijas ceļus, lai cīnītos ar rezistentu NSCLC.

NCI-H226 ir iekļauts arī plašākos vēža izpētes pasākumos, piemēram, NCI-60 zāļu skrīninga programmā, sniedzot ieskatu par tā farmakoloģiskajiem profiliem un tā lietderību augstas izšķirtspējas zāļu skrīningā. Šīs šūnu līnijas ģenētiskā un fenotipiskā stabilitāte vēl vairāk nostiprina tās nozīmi vēža pētniecībā un terapijas izstrādē.

Audums
Plaušas
Slimība
Pleiras epitēlioīdā mezotelioma
Sinonīmi
  • NCI-H226
  • NCI.H226
  • NCI H226
  • H-226
  • HUT-226
  • HUT 226
  • NCIH226

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
NCI-H226 (Cytion kataloga numurs 305091)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1544

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Etniskā piederība
Eiropas