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CAL33
Pañuelo de papel
Lengua
Enfermedad
Carcinoma de células escamosas
Sinónimos
Cal-33, CAL 33, CAL33, CAL-SCC-33, Centre Antoine Lacassagne-33

Documentos

CAL33

Cell line · Número de producto 305496

The CAL-33 cell line is a human squamous cell carcinoma line derived from a primary tumor of the tongue. Established from a male patient with moderately d...

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01Información general

Descripción

La línea celular CAL-33 es una línea de carcinoma escamoso humano derivada de un tumor primario de la lengua. Establecida a partir de un paciente varón con carcinoma escamoso moderadamente diferenciado, las células CAL-33 son conocidas por su robusto crecimiento in vitro y su capacidad tumorigénica cuando se inyectan en ratones inmunodeprimidos. Estas células presentan una morfología epitelial poligonal, con un tiempo de duplicación de aproximadamente 43 horas. Dado su origen, CAL-33 sirve como un modelo eficaz para estudiar la biología del carcinoma de células escamosas oral y de cabeza y cuello (HNSCC), específicamente en contextos donde se necesitan modelos de carcinoma HPV-negativo.

Las células CAL-33 son especialmente valiosas en la investigación oncológica radiológica debido a sus subclones bien caracterizados con diversos grados de radioresistencia y radiosensibilidad. Los estudios sobre estos subclones han revelado perfiles genómicos y transcriptómicos distintos, que contribuyen a respuestas diferenciales a la radiación. Las vías asociadas a la radioresistencia en CAL-33 incluyen la reparación del ADN, la senescencia, la apoptosis y la señalización PI3K/AKT, con la participación adicional de genes relacionados con el fenotipo secretor asociado a la senescencia (SASP). Estas características hacen de CAL-33 una herramienta importante para investigar las respuestas celulares inducidas por la radiación e identificar posibles dianas terapéuticas destinadas a superar la radioresistencia en el HNSCC.

Además, la línea celular CAL-33 también se utiliza para estudios de sensibilidad a fármacos, ya que muestra sensibilidad a diversos agentes quimioterapéuticos. Esta versatilidad en sus aplicaciones, que van desde la elucidación de vías oncogénicas básicas hasta estudios terapéuticos y de radiación aplicados, ha consolidado a CAL-33 como una línea celular destacada en la investigación del cáncer centrada en los carcinomas escamosos agresivos de la cavidad oral.

Pañuelo de papel
Lengua
Enfermedad
Carcinoma de células escamosas
Sinónimos
  • Cal-33
  • CAL 33
  • CAL33
  • CAL-SCC-33
  • Centre Antoine Lacassagne-33

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial

04Identificadores

Referencia
CAL33 (número de catálogo Cytion 305496)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1108

05Expresión y susceptibilidad

Perfil mutacional
Mutación: TMPRSS2, p.Gly8Val (c.23G>T) (c.-57+99G>T), homocigótica; Mutación: TP53, p.Arg175His (c.524G>A)

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 - 2 x 104 células/cm2
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
69 años
Origen étnico
Caucásico