Přejít na obsah
CAL33
Tkáň
Jazyk
Nemoc
Dlaždicobuněčný karcinom
Synonyma
Cal-33, CAL 33, CAL33, CAL-SCC-33, Centre Antoine Lacassagne-33

Dokumenty

CAL33

Cell line · Číslo výrobku 305496

The CAL-33 cell line is a human squamous cell carcinoma line derived from a primary tumor of the tongue. Established from a male patient with moderately d...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie CAL-33 je lidská linie dlaždicových karcinomů odvozená z primárního nádoru jazyka. Buňky CAL-33, které byly vytvořeny z mužského pacienta s mírně diferencovaným dlaždicovým karcinomem, jsou známé svým robustním růstem in vitro a tumorigenní schopností při injekčním podání imunokompromitovaným myším. Tyto buňky vykazují polygonální epiteliální morfologii s dobou zdvojnásobení přibližně 43 hodin. Vzhledem ke svému původu slouží CAL-33 jako účinný model pro studium biologie karcinomu dlaždicových buněk ústní dutiny a hlavy a krku (HNSCC), zejména v kontextech, kde jsou nezbytné modely karcinomu HPV-negativního.

CAL-33 je obzvláště cenný v radiační onkologické výzkumu díky svým dobře charakterizovaným subklonům s různým stupněm radioresistence a radiosenzitivity. Studie těchto subklonů ukázaly odlišné genomické a transkriptomické profily, které přispívají k rozdílné reakci na záření. Mezi cesty spojené s radioresistencí v CAL-33 patří oprava DNA, senescence, apoptóza a PI3K/AKT signalizace, s další účastí genů spojených se senescence-associated secretory phenotype (SASP). Tyto vlastnosti činí CAL-33 významným nástrojem pro zkoumání radiačně indukovaných buněčných reakcí a identifikaci potenciálních terapeutických cílů zaměřených na překonání radioresistence v HNSCC.

Kromě toho se buněčná linie CAL-33 používá také pro studie citlivosti na léky, protože vykazuje citlivost na různé chemoterapeutické látky. Tato univerzálnost použití – od základního objasnění onkogenních drah až po aplikovanou terapii a studie radiace – upevnila pozici CAL-33 jako významné buněčné linie v onkologickém výzkumu zaměřeném na agresivní spinocelulární karcinomy ústní dutiny.

Tkáň
Jazyk
Nemoc
Dlaždicobuněčný karcinom
Synonyma
  • Cal-33
  • CAL 33
  • CAL33
  • CAL-SCC-33
  • Centre Antoine Lacassagne-33

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citace
CAL33 (katalogové číslo Cytion 305496)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1108

05Exprese a náchylnost

Mutační profil
Mutace: TMPRSS2, p.Gly8Val (c.23G>T) (c.-57+99G>T), homozygotní; Mutace: TP53, p.Arg175His (c.524G>A)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1–2 x 104 buněk/cm2
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
69 let
Etnická příslušnost
Kavkazský