Mine otse sisu juurde
CAL33
Kude
Keel
Haigus
Rakk-kartsinoom
Sünonüümid
Cal-33, CAL 33, CAL33, CAL-SCC-33, Centre Antoine Lacassagne-33

Dokumendid

CAL33

Cell line · Toote number 305496

The CAL-33 cell line is a human squamous cell carcinoma line derived from a primary tumor of the tongue. Established from a male patient with moderately d...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

CAL-33 rakuliin on inimese lamerakk-kartsinoomi liin, mis on saadud keele primaarse kasvaja rakudest. CAL-33 rakud on saadud mõõdukalt diferentseeritud lamerakk-kartsinoomiga meespatsiendilt ja need on tuntud oma tugeva in vitro kasvu ja kasvajate tekitamise võime poolest, kui neid süstitakse immuunpuudulikkusega hiirtesse. Need rakud on polügonaalse epiteelimorfoloogiaga ja nende kahekordistumisaeg on umbes 43 tundi. Arvestades oma päritolu, on CAL-33 efektiivne mudel suuõõne ja pea-kaelapiirkonna lamerakk-kartsinoomi (HNSCC) bioloogia uurimiseks, eriti olukordades, kus on vaja HPV-negatiivseid kartsinoomi mudeleid.

CAL-33 on eriti väärtuslik kiiritusonkoloogia uuringutes tänu oma hästi iseloomustatud subkloonidele, millel on erinev kiirgustaluvus ja kiirgustundlikkus. Nende subkloonide uuringud on näidanud erinevaid genoomi- ja transkriptomi profiile, mis mõjutavad erinevaid kiirgusreaktsioone. CAL-33 kiirgustaluvusega seotud signaaliteed hõlmavad DNA parandamist, vananemist, apoptoosi ja PI3K/AKT signaalimist, millele lisanduvad vananemisega seotud sekretoorse fenotüübiga (SASP) seotud geenid. Need omadused muudavad CAL-33 oluliseks vahendiks kiirgusest tingitud rakuvastuste uurimisel ja potentsiaalsete terapeutiliste sihtmärkide kindlaksmääramisel, mille eesmärk on ületada HNSCC kiirgustaluvus.

Lisaks kasutatakse CAL-33 rakuliini ka ravimite tundlikkuse uuringutes, kuna see on tundlik mitmesuguste kemoteraapiavahendite suhtes. See mitmekülgsus rakendustes – alates põhiliste onkogeensete rakkude selgitamisest kuni rakendatud teraapiate ja kiirgusuuringuteni – on kindlustanud CAL-33 positsiooni silmapaistva rakuliinina vähktõve uuringutes, mis keskenduvad agressiivsetele suuõõne lamerakk-kartsinoomidele.

Kude
Keel
Haigus
Rakk-kartsinoom
Sünonüümid
  • Cal-33
  • CAL 33
  • CAL33
  • CAL-SCC-33
  • Centre Antoine Lacassagne-33

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
CAL33 (Cytioni katalooginumber 305496)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1108

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: TMPRSS2, p.Gly8Val (c.23G>T) (c.-57+99G>T), homosügootne; Mutatsioon: TP53, p.Arg175His (c.524G>A)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1–2 x 104 rakku/cm2
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
69 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia