Siirry sisältöön
CAL33
Kudos
Kieli
Sairaus
Okasolusyöpä
Synonyymit
Cal-33, CAL 33, CAL33, CAL-SCC-33, Centre Antoine Lacassagne-33

Asiakirjat

CAL33

Cell line · Tuotenumero 305496

The CAL-33 cell line is a human squamous cell carcinoma line derived from a primary tumor of the tongue. Established from a male patient with moderately d...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

CAL-33-solulinja on ihmisen levyepiteelikarsinooma, joka on peräisin kielen primaarikasvaimesta. CAL-33-solut on perustettu kohtalaisen erilaistuneesta levyepiteelikarsinoomasta kärsivästä miespotilaasta, ja ne tunnetaan voimakkaasta kasvustaan in vitro ja tuumorigeenisyydestään, kun ne ruiskutetaan immuunipuutteisiin hiiriin. Nämä solut ovat monikulmaisia epiteelisoluja, joiden kaksinkertaistumisaika on noin 43 tuntia. Alkuperänsä vuoksi CAL-33 on tehokas malli suun ja pään ja kaulan levyepiteelikarsinooman (HNSCC) biologian tutkimiseen, erityisesti tilanteissa, joissa tarvitaan HPV-negatiivisia karsinoomamalleja.

CAL-33 on erityisen arvokas sädehoidon tutkimuksessa, koska sen alikloonit ovat hyvin karakterisoituja ja niillä on vaihtelevia säteilyresistenssin ja säteilyherkkyyden asteita. Näitä aliklooneja koskevat tutkimukset ovat osoittaneet selkeitä genomi- ja transkriptomiprofiileja, jotka vaikuttavat erilaisiin säteilyvasteisiin. CAL-33:n säteilyresistenssiin liittyvät reitit sisältävät DNA:n korjauksen, vanhenemisen, apoptoosin ja PI3K/AKT-signaloinnin, ja lisäksi niihin liittyy vanhenemiseen liittyvästä eritysfeneotyypistä (SASP) johtuvia geenejä. Nämä ominaisuudet tekevät CAL-33:sta merkittävän työkalun säteilyn aiheuttamien soluvasteiden tutkimiseen ja potentiaalisten terapeuttisten kohteiden tunnistamiseen, joiden avulla pyritään voittamaan HNSCC:n säteilyresistenssi.

Lisäksi CAL-33-solulinjaa käytetään myös lääkeherkkyystutkimuksissa, koska se on herkkä useille kemoterapeuttisille aineille. Tämä monipuolisuus sovelluksissa – perustason onkogeenisten reittien selvittämisestä sovelletun terapeuttisen hoidon ja säteilytutkimuksiin – on vahvistanut CAL-33:n asemaa merkittävänä solulinjana syövän tutkimuksessa, joka keskittyy aggressiivisiin suuontelon levyepiteelikarsinoomiin.

Kudos
Kieli
Sairaus
Okasolusyöpä
Synonyymit
  • Cal-33
  • CAL 33
  • CAL33
  • CAL-SCC-33
  • Centre Antoine Lacassagne-33

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen

04Tunnisteet

Lähdeviite
CAL33 (Cytion-tuotenumero 305496)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1108

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Mutaatiot: TMPRSS2, p.Gly8Val (c.23G>T) (c.-57+99G>T), homotsygoottinen; Mutaatiot: TP53, p.Arg175His (c.524G>A)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
1–2 x 104 solua/cm2
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
69 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen