Prejsť na obsah
CAL33
Tkanivo
Jazyk
Choroba
Spinocelulárny karcinóm
Synonymá
Cal-33, CAL 33, CAL33, CAL-SCC-33, Centre Antoine Lacassagne-33

Dokumenty

CAL33

Cell line · Číslo výrobku 305496

The CAL-33 cell line is a human squamous cell carcinoma line derived from a primary tumor of the tongue. Established from a male patient with moderately d...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunka CAL-33 je ľudská bunka karcinómu dlaždicových buniek odvodená z primárneho nádoru jazyka. Bunky CAL-33, ktoré boli vytvorené z mužského pacienta s mierne diferencovaným karcinómom dlaždicových buniek, sú známe svojím robustným rastom in vitro a tumorigenickou schopnosťou pri injekčnom podaní imunokompromitovaným myšiam. Tieto bunky vykazujú polygonálnu epiteliálnu morfológiu s časom zdvojnásobenia približne 43 hodín. Vzhľadom na svoj pôvod slúži CAL-33 ako účinný model na štúdium biológie skvamózneho karcinómu ústnej dutiny a hlavy a krku (HNSCC), konkrétne v kontextoch, kde sú potrebné modely HPV-negatívneho karcinómu.

CAL-33 je obzvlášť cenný vo výskume radiačnej onkológie vďaka svojim dobre charakterizovaným subklonom s rôznym stupňom radioresistencie a rádioenzitivity. Štúdie týchto subklonov preukázali odlišné genómové a transkriptómové profily, ktoré prispievajú k diferenciálnym reakciám na žiarenie. Cesty spojené s radioresistenciou v CAL-33 zahŕňajú opravu DNA, senescenciu, apoptózu a PI3K/AKT signalizáciu, s dodatočnou účasťou génov spojených so senescenciou asociovaným sekrečným fenotypom (SASP). Tieto vlastnosti robia z CAL-33 významný nástroj na skúmanie radiačne indukovaných bunkových reakcií a identifikáciu potenciálnych terapeutických cieľov zameraných na prekonanie radioresistencie v HNSCC.

Okrem toho sa bunková línia CAL-33 používa aj na štúdie citlivosti na lieky, pretože vykazuje citlivosť na rôzne chemoterapeutické látky. Táto univerzálnosť v aplikáciách – od základného objasňovania onkogénnych dráh až po aplikované terapeutické a radiačné štúdie – upevnila pozíciu CAL-33 ako významnej bunky v onkologickom výskume zameranom na agresívne skvamózne karcinómy ústnej dutiny.

Tkanivo
Jazyk
Choroba
Spinocelulárny karcinóm
Synonymá
  • Cal-33
  • CAL 33
  • CAL33
  • CAL-SCC-33
  • Centre Antoine Lacassagne-33

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citácia
CAL33 (číslo katalógu Cytion 305496)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1108

05Prejav a náchylnosť

Mutčný profil
Mutácia: TMPRSS2, p.Gly8Val (c.23G>T) (c.-57+99G>T), homozygotná; Mutácia: TP53, p.Arg175His (c.524G>A)

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 – 2 x 104 buniek/cm2
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
69 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský