Pāriet uz saturu
CAL33
Audums
Valoda
Slimība
Plakanšūnu karcinoma
Sinonīmi
Cal-33, CAL 33, CAL33, CAL-SCC-33, Centre Antoine Lacassagne-33

Dokumenti

CAL33

Cell line · Preces numurs 305496

The CAL-33 cell line is a human squamous cell carcinoma line derived from a primary tumor of the tongue. Established from a male patient with moderately d...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

CAL-33 šūnu līnija ir cilvēka plakanšūnu karcinomas līnija, kas iegūta no primārā mēles audzēja. CAL-33 šūnas, kas iegūtas no vīrieša pacienta ar vidēji diferencētu plakanšūnu karcinomu, ir pazīstamas ar spēcīgu augšanu in vitro un tumorogēno spēju, kad tās injicē imūndeficītiem pelēm. Šīs šūnas uzrāda daudzstūra epitelu morfoloģiju, un to divkāršošanās laiks ir aptuveni 43 stundas. Ņemot vērā tās izcelsmi, CAL-33 kalpo kā efektīvs modelis mutvārdu un galvas un kakla plakanšūnu karcinomas (HNSCC) bioloģijas pētīšanai, īpaši gadījumos, kad nepieciešami HPV negatīvi karcinomas modeļi.

CAL-33 ir īpaši vērtīgs staru onkoloģijas pētījumos, jo tam ir labi raksturoti subkloni ar dažādu radiorezistences un radiosensitivitātes pakāpi. Pētījumi par šiem subkloniem ir parādījuši atšķirīgus genomu un transkriptomu profilus, kas veicina atšķirīgas reakcijas uz starojumu. Ar CAL-33 radiorezistenci saistītās ceļas ietver DNS reparāciju, senescenci, apoptozi un PI3K/AKT signālu pārraidi, papildus iesaistot gēnus, kas saistīti ar senescenci saistītu sekretorisko fenotipu (SASP). Šīs īpašības padara CAL-33 par nozīmīgu instrumentu, lai pētītu staru izraisītas šūnu reakcijas un identificētu potenciālos terapeitiskos mērķus, kuru mērķis ir pārvarēt radiorezistenci HNSCC.

Turklāt CAL-33 šūnu līnija tiek izmantota arī zāļu jutības pētījumos, jo tā izrāda jutību pret dažādiem ķīmijterapijas līdzekļiem. Šī daudzpusīgā pielietojamība — sākot no pamata onkogēno ceļu izpētes līdz lietišķajai terapijai un starojuma pētījumiem — ir nostiprinājusi CAL-33 kā izcilu šūnu līniju vēža pētījumos, kas vērsti uz agresīviem mutējošajiem plakanšūnu karcinomiem.

Audums
Valoda
Slimība
Plakanšūnu karcinoma
Sinonīmi
  • Cal-33
  • CAL 33
  • CAL33
  • CAL-SCC-33
  • Centre Antoine Lacassagne-33

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs

04Identifikatori

Atsauce
CAL33 (Cytion kataloga numurs 305496)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1108

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: TMPRSS2, p.Gly8Val (c.23G>T) (c.-57+99G>T), homozigota; Mutācija: TP53, p.Arg175His (c.524G>A)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1–2 x 104 šūnas/cm2
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
69 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis