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HMy2.CIR
Pañuelo de papel
Linfoblasto B
Sinónimos
Hmy.2 CIR, HMy2.CIR, C1R

Documentos

HMy2.CIR

Cell line · Número de producto 305126

The HMy2.CIR cell line was developed through gamma irradiation and subsequent selection for the loss of HLA class I antigen expression from the HMy.2 B ly...

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01Información general

Descripción

La línea celular HMy2.CIR se desarrolló mediante irradiación gamma y posterior selección para la pérdida de expresión del antígeno HLA de clase I a partir de la línea celular linfoblastoide HMy.2 B. Esta línea celular parental es un mutante de crecimiento rápido derivado de la línea celular ARH-77. Las células HMy2.CIR son especialmente valiosas como huéspedes para genes transfectados de antígenos de histocompatibilidad mayor de clase I, ofreciendo una plataforma versátil para estudiar la presentación de antígenos y los mecanismos de respuesta inmunitaria.

Se sabe que la línea celular ARH-77, de la que deriva en última instancia HMy2.CIR, es positiva para el antígeno nuclear de Epstein-Barr (EBNA+) y el antígeno de la cápside viral de Epstein-Barr (EBVCA+). En consecuencia, se presume que la línea celular HMy2.CIR también es EBNA positiva. Esta línea celular se caracteriza por su expresión de pequeñas cantidades de HLA Cw4, pero no expresa productos de los locus HLA A o B. Este perfil único de expresión de antígenos convierte a las células HMy2.CIR en un modelo útil para la investigación inmunológica, particularmente en el estudio del procesamiento y presentación de antígenos restringidos por HLA clase I.

Pañuelo de papel
Linfoblasto B
Sinónimos
  • Hmy.2 CIR
  • HMy2.CIR
  • C1R

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Suspensión
Nivel de bioseguridad
2

03Características

Morfología
Linfoblasto

04Identificadores

Referencia
HMy2.CIR (número de catálogo 305126 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3714

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
IMDM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 25 mM de HEPES, w: 1,0 mM de piruvato sódico, w: 3,024 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820800a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Subcultivo
Homogeneice suavemente la suspensión celular en el matraz pipeteando hacia arriba y hacia abajo, y luego tome una muestra representativa para determinar la densidad celular por ml. Diluya la suspensión para alcanzar una concentración celular de 1 x 105 células/ml con medio de cultivo fresco, y divida la suspensión ajustada en nuevos matraces para su posterior cultivo.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
33 años
Origen étnico
Caucásico