Pāriet uz saturu
HMy2.CIR
Audums
B-limfoblasts
Sinonīmi
Hmy.2 CIR, HMy2.CIR, C1R

Dokumenti

HMy2.CIR

Cell line · Preces numurs 305126

The HMy2.CIR cell line was developed through gamma irradiation and subsequent selection for the loss of HLA class I antigen expression from the HMy.2 B ly...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HMy2.CIR šūnu līniju izveidoja, izmantojot gamma apstarošanu un sekojošu selekciju, lai HMy.2 B limfoblastoīdu šūnu līnija zaudētu HLA I klases antigēna ekspresiju. Šī vecāku šūnu līnija ir ātri augošs mutants, kas atvasināts no ARH-77 šūnu līnijas. HMy2.CIR šūnas ir īpaši vērtīgas kā I klases galveno histokompatibilitātes antigēnu gēnu transfekcijas saimnieces, piedāvājot daudzpusīgu platformu antigēnu prezentācijas un imūnreakcijas mehānismu izpētei.

ARH-77 šūnu līnija, no kuras galu galā atvasina HMy2.CIR, ir pozitīva attiecībā uz Epšteina-Barra kodola antigēnu (EBNA+) un Epšteina-Barra vīrusa kapsīdas antigēnu (EBVCA+). Līdz ar to tiek pieņemts, ka arī HMy2.CIR šūnu līnija ir EBNA pozitīva. Šai šūnu līnijai ir raksturīga neliela HLA Cw4 ekspresija, bet tā neekspresē HLA A vai B lokusa produktus. Šis unikālais antigēnu ekspresijas profils padara HMy2.CIR šūnas par noderīgu modeli imunoloģiskiem pētījumiem, jo īpaši pētījumiem par HLA I klases ierobežotu antigēnu apstrādi un prezentāciju.

Audums
B-limfoblasts
Sinonīmi
  • Hmy.2 CIR
  • HMy2.CIR
  • C1R

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Limfoblasts

04Identifikatori

Atsauce
HMy2.CIR (Cytion kataloga numurs 305126)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_3714

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
IMDM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM nātrija piruvāta, w: 3,024 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820800a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Pārstādīšana
Viegli homogenizējiet šūnu suspensiju kolbā, pipetējot uz augšu un uz leju, pēc tam ņemiet reprezentatīvu paraugu, lai noteiktu šūnu blīvumu uz ml. Atšķaidiet suspensiju, lai sasniegtu šūnu koncentrāciju 1 x 105 šūnas/ml ar svaigu kultūras barotni, un sadaliet pielāgoto suspensiju jaunās kolbās turpmākai kultivēšanai.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
33 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis