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HMy2.CIR
Tecido
B-Linfoblasto
Sinónimos
Hmy.2 CIR, HMy2.CIR, C1R

Documentos

HMy2.CIR

Cell line · Número do produto 305126

The HMy2.CIR cell line was developed through gamma irradiation and subsequent selection for the loss of HLA class I antigen expression from the HMy.2 B ly...

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1

01Informações gerais

Descrição

A linha de células HMy2.CIR foi desenvolvida através de irradiação gama e subsequente seleção para a perda da expressão do antigénio HLA de classe I da linha de células linfoblastóides HMy.2 B. Esta linha celular parental é um mutante de crescimento rápido derivado da linha celular ARH-77. As células HMy2.CIR são particularmente valiosas como hospedeiras de genes transfectados de antigénios de histocompatibilidade principal de classe I, oferecendo uma plataforma versátil para o estudo da apresentação de antigénios e dos mecanismos de resposta imunitária.

Sabe-se que a linha celular ARH-77, da qual derivam as células HMy2.CIR, é positiva para o antigénio nuclear de Epstein-Barr (EBNA+) e para o antigénio do capsídeo viral de Epstein-Barr (EBVCA+). Consequentemente, presume-se que a linha celular HMy2.CIR também seja EBNA positiva. Esta linha celular caracteriza-se pela expressão de pequenas quantidades de HLA Cw4, mas não expressa produtos dos locus HLA A ou B. Este perfil único de expressão de antigénios faz das células HMy2.CIR um modelo útil para a investigação imunológica, particularmente no estudo do processamento e apresentação de antigénios restritos a HLA de classe I.

Tecido
B-Linfoblasto
Sinónimos
  • Hmy.2 CIR
  • HMy2.CIR
  • C1R

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Suspensão
Nível de biossegurança
2

03Características

Morfologia
Linfoblasto

04Identificadores

Referência
HMy2.CIR (número de catálogo da Cytion 305126)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3714

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
IMDM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-glutamina, com: 25 mM de HEPES, com: 1,0 mM de piruvato de sódio, com: 3,024 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820800a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Subcultura
Homogeneize suavemente a suspensão celular no frasco pipetando para cima e para baixo e, em seguida, recolha uma amostra representativa para determinar a densidade celular por ml. Dilua a suspensão para atingir uma concentração celular de 1 x 105 células/ml com meio de cultura fresco e alique a suspensão ajustada em novos frascos para cultivo adicional.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
33 anos
Etnia
Caucasiano