Przejdź do treści
HMy2.CIR
Chusteczka
B-Limfoblast
Synonimy
Hmy.2 CIR, HMy2.CIR, C1R

Dokumenty

HMy2.CIR

Cell line · Numer produktu 305126

The HMy2.CIR cell line was developed through gamma irradiation and subsequent selection for the loss of HLA class I antigen expression from the HMy.2 B ly...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa HMy2.CIR została opracowana poprzez napromieniowanie gamma i późniejszą selekcję pod kątem utraty ekspresji antygenu HLA klasy I z linii limfoblastoidalnych komórek B HMy.2. Ta macierzysta linia komórkowa jest szybko rosnącym mutantem pochodzącym z linii komórkowej ARH-77. Komórki HMy2.CIR są szczególnie cenne jako gospodarze dla transfekowanych genów głównych antygenów zgodności tkankowej klasy I, oferując wszechstronną platformę do badania mechanizmów prezentacji antygenów i odpowiedzi immunologicznej.

Linia komórkowa ARH-77, z której ostatecznie uzyskano HMy2.CIR, jest pozytywna pod względem antygenu jądrowego wirusa Epsteina-Barr (EBNA+) i antygenu kapsydu wirusa Epsteina-Barr (EBVCA+). W związku z tym zakłada się, że linia komórkowa HMy2.CIR jest również dodatnia pod względem EBNA. Ta linia komórkowa charakteryzuje się ekspresją niewielkich ilości HLA Cw4, ale nie wykazuje ekspresji produktów locus HLA A lub B. Ten unikalny profil ekspresji antygenów sprawia, że komórki HMy2.CIR są użytecznym modelem do badań immunologicznych, szczególnie w badaniach nad przetwarzaniem i prezentacją antygenów ograniczonych do HLA klasy I.

Chusteczka
B-Limfoblast
Synonimy
  • Hmy.2 CIR
  • HMy2.CIR
  • C1R

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
2

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Limfoblast

04Identyfikatory

Źródło
HMy2.CIR (numer katalogowy Cytion 305126)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_3714

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
IMDM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM pirogronianu sodu, w: 3,024 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820800a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Hodowla komórek w subkulturze
Delikatnie homogenizować zawiesinę komórek w kolbie, pipetując w górę i w dół, a następnie pobrać reprezentatywną próbkę w celu określenia gęstości komórek na ml. Rozcieńczyć zawiesinę świeżym podłożem hodowlanym, aby uzyskać stężenie komórek wynoszące 1 x 105 komórek/ml, a następnie podzielić dostosowaną zawiesinę na porcje w nowych kolbach w celu dalszej hodowli.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
33 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski