Mine otse sisu juurde
HMy2.CIR
Kude
B-lümfoblast
Sünonüümid
Hmy.2 CIR, HMy2.CIR, C1R

Dokumendid

HMy2.CIR

Cell line · Toote number 305126

The HMy2.CIR cell line was developed through gamma irradiation and subsequent selection for the loss of HLA class I antigen expression from the HMy.2 B ly...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Rakuliin HMy2.CIR on välja töötatud gammakiirituse ja sellele järgneva selektsiooni abil, et kaotada HLA I klassi antigeeni ekspressioon B-lümfoblastoidide rakuliinist HMy.2. See vanemrakuliin on ARH-77 rakuliinist saadud kiiresti kasvav mutant. HMy2.CIR rakud on eriti väärtuslikud transfekteeritud I klassi peamiste histokompatibility antigeenide peremeesrühmana, pakkudes mitmekülgset platvormi antigeenide esitlemise ja immuunvastuse mehhanismide uurimiseks.

ARH-77 rakuliin, millest HMy2.CIR on lõppkokkuvõttes saadud, on teadaolevalt positiivne Epstein-Barri tuumaantigeeni (EBNA+) ja Epstein-Barri viiruse kapsidi antigeeni (EBVCA+) suhtes. Järelikult eeldatakse, et ka rakuliin HMy2.CIR on EBNA-positiivne. Seda rakuliini iseloomustab HLA Cw4 väikese hulga ekspressioon, kuid see ei ekspresseeri HLA A- või B-lookuse tooteid. See ainulaadne antigeeni ekspressiooniprofiil muudab HMy2.CIR rakud kasulikuks mudeliks immunoloogilistes uuringutes, eriti HLA I klassi piiratud antigeenide töötlemise ja esitlemise uurimisel.

Kude
B-lümfoblast
Sünonüümid
  • Hmy.2 CIR
  • HMy2.CIR
  • C1R

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Lümfoblastid

04Tunnused

Viide
HMy2.CIR (Cytioni katalooginumber 305126)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_3714

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
IMDM, w: 4,5 g/L glükoos, w: 4 mM L-glutamiin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 3,024 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820800a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Kultuuri edasikasvatamine
Homogeniseerige kolvis olev rakususpensioon õrnalt pipeteerides üles-alla, seejärel võtke representatiivne proov, et määrata rakkude tihedus ml kohta. Lahjendage suspensiooni värske kultuurikeskkonnaga, et saavutada rakkude kontsentratsioon 1 x 105 rakku/ml, ja jaotage reguleeritud suspensioon uute kolvide vahel edasiseks kasvatamiseks.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
33 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia