Siirry sisältöön
HMy2.CIR
Kudos
B-Lymfoblastit
Synonyymit
Hmy.2 CIR, HMy2.CIR, C1R

Asiakirjat

HMy2.CIR

Cell line · Tuotenumero 305126

The HMy2.CIR cell line was developed through gamma irradiation and subsequent selection for the loss of HLA class I antigen expression from the HMy.2 B ly...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HMy2.CIR-solulinja kehitettiin gammasäteilytyksellä ja sitä seuranneella valinnalla, jotta HLA-luokan I antigeenin ilmentyminen HMy.2 B-lymfoblastoidisolulinjasta menetettäisiin. Tämä emosolulinja on nopeasti kasvava mutantti, joka on peräisin ARH-77-solulinjasta. HMy2.CIR-solut ovat erityisen arvokkaita transfektoitujen luokan I päähistokompatibiliteettiantigeenigeenien isäntänä, ja ne tarjoavat monipuolisen alustan antigeenien esittelyn ja immuunivasteen mekanismien tutkimiseen.

ARH-77-solulinjan, josta HMy2.CIR-solu on viime kädessä johdettu, tiedetään olevan positiivinen Epstein-Barr-ytimen antigeenin (EBNA+) ja Epstein-Barr-viruksen kapsidiantigeenin (EBVCA+) suhteen. Näin ollen myös HMy2.CIR-solulinjan oletetaan olevan EBNA-positiivinen. Tälle solulinjalle on ominaista, että se ilmentää pieniä määriä HLA Cw4:ää, mutta se ei ilmentä HLA A- tai B-lokuksen tuotteita. Tämä ainutlaatuinen antigeenien ilmentymisprofiili tekee HMy2.CIR-soluista hyödyllisen mallin immunologiseen tutkimukseen, erityisesti HLA-luokan I rajoitetun antigeenin prosessoinnin ja esittelyn tutkimiseen.

Kudos
B-Lymfoblastit
Synonyymit
  • Hmy.2 CIR
  • HMy2.CIR
  • C1R

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Lymfoblastit

04Tunnisteet

Lähdeviite
HMy2.CIR (Cytion-tuotenumero 305126)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_3714

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
IMDM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia, w: 3,024 g/l NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820800a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Soluviljely
Homogenoi solususpensio varovasti pullossa pipetoimalla ylös ja alas, ota sitten edustava näyte solutiheyden määrittämiseksi millilitraa kohti. Laimenna suspensio tuoreella viljelyalustalla solupitoisuudeksi 1 x 105 solua/ml ja jaa säädetty suspensio uusiin pulloihin jatkokäsittelyä varten.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
33 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen