Sebocitos humanos

Las células sebocíticas humanas son células epiteliales especializadas derivadas de las glándulas sebáceas de la piel, que son glándulas holocrinas asociadas a los folículos pilosos y distribuidas por la mayor parte de la superficie cutánea. Los sebocitos son responsables de la síntesis, acumulación y secreción del sebo, una mezcla compleja de lípidos que incluye triglicéridos, ésteres de cera, escualeno, ésteres de colesterol y ácidos grasos libres. Los modelos de sebocitos humanos in vitro se establecen normalmente como cultivos primarios aislados de las glándulas sebáceas faciales o del cuero cabelludo, o como líneas de sebocitos inmortalizados generados mediante modificaciones genéticas definidas para permitir una proliferación prolongada, al tiempo que se conserva la capacidad de producir lípidos.

Fenotípicamente, los sebocitos humanos muestran un programa de diferenciación característico marcado por la acumulación progresiva de gotas de lípidos intracelulares y el agrandamiento del citoplasma antes de la secreción holocrina terminal. Expresan marcadores epiteliales y asociados a los sebocitos, como citoqueratinas (por ejemplo, K7, K8, K18), receptores activados por proliferadores de peroxisomas (PPARα y PPARγ), proteínas de unión al elemento regulador del esterol (SREBP) y enzimas implicadas en la biosíntesis de lípidos, como la sintasa de ácidos grasos (FASN) y la estearoil-CoA desaturasa. La diferenciación de los sebocitos y la lipogénesis están reguladas por andrógenos, factor de crecimiento similar a la insulina 1 (IGF-1), retinoides, citocinas inflamatorias y vías de señalización de receptores Toll. Estas células también participan activamente en la inmunidad innata mediante la producción de péptidos antimicrobianos y mediadores proinflamatorios en respuesta a estímulos microbianos como Cutibacterium acnes.

Los modelos celulares de sebocitos humanos se utilizan ampliamente en la investigación dermatológica y cosmética para investigar la patogénesis del acné, la dermatitis seborreica, la señalización de los andrógenos, el metabolismo de los lípidos, la señalización inflamatoria y las respuestas a los fármacos. Proporcionan una plataforma controlada para evaluar los efectos de la modulación hormonal, los retinoides, los antiandrógenos, los agonistas del PPAR y los compuestos antiinflamatorios sobre la biología de las glándulas sebáceas. Cuando se utilizan sebocitos primarios, los investigadores deben tener en cuenta la variabilidad de los donantes y su limitada esperanza de vida, mientras que las líneas de sebocitos inmortalizados ofrecen una mejor reproducibilidad, pero pueden presentar una cinética de diferenciación alterada en comparación con el tejido glandular sebáceo nativo.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía