Mänskliga sebocyter

Mänskliga sebocytceller är specialiserade epitelceller som härrör från hudens talgkörtlar, vilka är holokrina körtlar associerade med hårsäckar och fördelade över större delen av hudytan. Sebocyter ansvarar för syntesen, ackumuleringen och utsöndringen av talg, en komplex blandning av lipider som inkluderar triglycerider, vaxestrar, skvalen, kolesterolestrar och fria fettsyror. In vitro-modeller av humana sebocyter etableras vanligtvis antingen som primärkulturer isolerade från talgkörtlar i ansiktet eller hårbotten eller som odödliga sebocytlinjer som genereras genom definierade genetiska modifieringar för att möjliggöra utökad proliferation samtidigt som lipidproduktionskapaciteten bibehålls.

Fenotypiskt uppvisar humana sebocyter ett karakteristiskt differentieringsprogram som kännetecknas av progressiv intracellulär ackumulering av lipiddroppar och förstoring av cytoplasman före terminal holokrin utsöndring. De uttrycker epitel- och sebocytassocierade markörer såsom cytokeratiner (t.ex. K7, K8, K18), peroxisomproliferatoraktiverade receptorer (PPARα och PPARγ), sterolreglerande elementbindande proteiner (SREBP) och enzymer som är involverade i lipidbiosyntes, inklusive fettsyrasyntas (FASN) och stearoyl-CoA-desaturas. Sebocytdifferentiering och lipogenes regleras av androgener, insulinliknande tillväxtfaktor-1 (IGF-1), retinoider, inflammatoriska cytokiner och Toll-liknande receptorsignaleringsvägar. Dessa celler deltar också aktivt i medfödd immunitet genom att producera antimikrobiella peptider och proinflammatoriska mediatorer som svar på mikrobiella stimuli såsom Cutibacterium acnes.

Mänskliga sebocytcellmodeller används i stor utsträckning inom dermatologisk och kosmetisk forskning för att undersöka aknepatogenes, seborroisk dermatit, androgensignalering, lipidmetabolism, inflammatorisk signalering och läkemedelsrespons. De utgör en kontrollerad plattform för utvärdering av effekterna av hormonell modulering, retinoider, antiandrogener, PPAR-agonister och antiinflammatoriska föreningar på talgkörtlarnas biologi. Vid användning av primära sebocyter måste forskarna ta hänsyn till donatorvariabilitet och begränsad livslängd, medan odödliga sebocytlinjer erbjuder förbättrad reproducerbarhet men kan uppvisa förändrad differentieringskinetik jämfört med naturlig talgkörtelvävnad.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring