Mine otse sisu juurde
HNO210 rakud
Kude
Larynks
Haigus
Pea ja kaela lamerakk-kartsinoom (HNSCC)

Dokumendid

HNO210 rakud

Cell line · Toote number 300134

Rakuliin HNO210 on saadud kõri lamerakulise kartsinoomi põhjal, mis on pea- ja kaelapiirkonna lamerakulise kartsinoomi (HNSCC) alatüüp. Sellel rakuliinil on b...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HNO210 rakuliin on saadud laryngeaalsest lamerakk-kartsinoomist, mis on pea ja kaela lamerakk-kartsinoomi (HNSCC) alatüüp. Seda rakuliini on põhjalikult iseloomustatud geneetiliste ja molekulaarsete omaduste poolest, mis muudab selle väärtuslikuks mudeliks HNSCC patogeneesi ja ravivastuste uurimiseks. HNO210 kromosoomide võrdleva genoomilise hübriidimise (cCGH) analüüs on paljastanud mitu olulist kromosoomiaberratsiooni. Nimelt esineb DNA koopiaarvu suurenemine kromosoomi piirkondades 3q, 7p, 7q, 9p, 9q, 20p ja 20q ning koopiaarvu vähenemine kromosoomi 3p, 4p, 4q ja kromosoomi 21 puhul. Need geneetilised muutused on HNSCC puhul tavalised ja neid seostatakse agressiivse kasvajakäitumise ja patsiendi halva prognoosiga.

Eelkõige pakub huvi selliste piirkondade nagu 3q ja 11q13 amplifikatsioon, mida esineb paljudes HNSCC rakuliinides, kuna see on seotud selliste onkogeenide nagu CCND1 (tsükliin D1) ja CTTN (kortaktiin) suurenenud ekspressiooniga. Need geenid on seotud vastavalt rakutsükli regulatsiooniga ja tsütoskeleti organiseerimisega ning nende üleekspressioon võib aidata kaasa rakkude suurenenud proliferatsioonile, invasiivsusele ja metastaasile. HNO210 rakuliin on oma eripärase geneetilise profiiliga usaldusväärne mudel, mille abil saab uurida kõhunäärmevähi progresseerumise aluseks olevaid molekulaarseid mehhanisme ja katsetada sihipäraseid ravimeetodeid, mis on suunatud nendele konkreetsetele geneetilistele kõrvalekalletele.

Lisaks on see rakuliin osa paneelist, mida kasutatakse kombineeritud ravi tõhususe uurimiseks, näiteks tsisplatiini ja talidomiidi kasutamine, mis on osutunud paljulubavaks kasvajavastase toime suurendamisel in vitro ja in vivo. Seetõttu on HNO210 oluline mitte ainult vähi alusuuringute, vaid ka translatsiooniliste uuringute jaoks, mille eesmärk on parandada HNSCC-patsientide ravitulemusi.

Kude
Larynks
Haigus
Pea ja kaela lamerakk-kartsinoom (HNSCC)

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
HNO210 (Cytioni katalooginumber 300134)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_D215

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
69 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia