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HNO210 Células
Tecido
Laringe
Doença
Carcinoma espinocelular da cabeça e do pescoço (HNSCC)

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HNO210 Células

Cell line · Número do produto 300134

A linha celular HNO210 é derivada de um carcinoma de células escamosas da laringe, um subtipo de carcinoma de células escamosas da cabeça e pescoço (HNSCC). Esta linha celular tem...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular HNO210 é derivada de um carcinoma de células escamosas da laringe, um subtipo de carcinoma de células escamosas da cabeça e do pescoço (HNSCC). Esta linha celular foi amplamente caracterizada pelas suas caraterísticas genéticas e moleculares, o que a torna um modelo valioso para o estudo da patogénese e das respostas ao tratamento do HNSCC. A análise da hibridação genómica comparativa cromossómica (cCGH) da HNO210 revelou várias aberrações cromossómicas significativas. Nomeadamente, apresenta ganhos de número de cópias de ADN nas regiões cromossómicas 3q, 7p, 7q, 9p, 9q, 20p e 20q, e perdas de número de cópias em 3p, 4p, 4q e no cromossoma 21. Estas alterações genéticas são comuns no CECP e estão associadas a um comportamento tumoral agressivo e a um mau prognóstico dos doentes.

Em particular, a amplificação de regiões como 3q e 11q13, que é observada em muitas linhas celulares de CECP, é de interesse devido à sua correlação com o aumento da expressão de oncogenes como CCND1 (ciclina D1) e CTTN (cortactina). Estes genes estão envolvidos na regulação do ciclo celular e na organização do citoesqueleto, respetivamente, e a sua sobreexpressão pode contribuir para uma maior proliferação celular, invasão e metástases. A linha celular HNO210, com o seu perfil genético distinto, constitui um modelo robusto para a investigação dos mecanismos moleculares subjacentes à progressão do cancro da laringe e para o ensaio de terapias orientadas para estas anomalias genéticas específicas.

Além disso, esta linha celular faz parte de um painel utilizado para explorar a eficácia de terapias combinadas, como a utilização de cisplatina com talidomida, que se revelaram promissoras no reforço da atividade antitumoral in vitro e in vivo. Isto faz com que o HNO210 seja crucial não só para a investigação básica do cancro, mas também para estudos de translação destinados a melhorar os resultados terapêuticos dos doentes com CECP.

Tecido
Laringe
Doença
Carcinoma espinocelular da cabeça e do pescoço (HNSCC)

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial

04Identificadores

Referência
HNO210 (número de catálogo Cytion 300134)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_D215

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
69 anos
Etnia
Caucasiano