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HNO210 Cellule
Tessuto
Laringe
Malattia
Carcinoma a cellule squamose della testa e del collo (HNSCC)

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HNO210 Cellule

Cell line · Codice prodotto 300134

La linea cellulare HNO210 deriva da un carcinoma a cellule squamose della laringe, un sottotipo di carcinoma a cellule squamose della testa e del collo (HNSCC). Questa linea cellulare presenta...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare HNO210 deriva da un carcinoma laringeo a cellule squamose, un sottotipo di carcinoma a cellule squamose della testa e del collo (HNSCC). Questa linea cellulare è stata ampiamente caratterizzata per le sue caratteristiche genetiche e molecolari, che la rendono un modello prezioso per lo studio della patogenesi e delle risposte ai trattamenti dell'HNSCC. L'analisi di ibridazione genomica comparativa cromosomica (cCGH) di HNO210 ha rivelato diverse aberrazioni cromosomiche significative. In particolare, presenta guadagni di numero di copie di DNA nelle regioni cromosomiche 3q, 7p, 7q, 9p, 9q, 20p e 20q e perdite di numero di copie in 3p, 4p, 4q e nel cromosoma 21. Queste alterazioni genetiche sono comuni nell'HNSCC. Queste alterazioni genetiche sono comuni negli HNSCC e sono associate a un comportamento tumorale aggressivo e a una prognosi sfavorevole per i pazienti.

In particolare, l'amplificazione di regioni come 3q e 11q13, riscontrata in molte linee cellulari di HNSCC, è interessante per la sua correlazione con l'aumento dell'espressione di oncogeni come CCND1 (ciclina D1) e CTTN (cortactina). Questi geni sono coinvolti rispettivamente nella regolazione del ciclo cellulare e nell'organizzazione citoscheletrica e la loro sovraespressione può contribuire ad aumentare la proliferazione cellulare, l'invasione e le metastasi. La linea cellulare HNO210, con il suo profilo genetico distinto, funge da modello robusto per studiare i meccanismi molecolari alla base della progressione del cancro laringeo e per testare terapie mirate che affrontino queste specifiche anomalie genetiche.

Inoltre, questa linea cellulare fa parte di un pannello utilizzato per esplorare l'efficacia delle terapie di combinazione, come l'uso del cisplatino con la talidomide, che si sono dimostrate promettenti nel potenziare l'attività antitumorale in vitro e in vivo. Ciò rende HNO210 non solo fondamentale per la ricerca oncologica di base, ma anche per gli studi traslazionali volti a migliorare i risultati terapeutici per i pazienti affetti da HNSCC.

Tessuto
Laringe
Malattia
Carcinoma a cellule squamose della testa e del collo (HNSCC)

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HNO210 (numero di catalogo Cytion 300134)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_D215

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
69 anni
Etnia
Caucasico