Mine otse sisu juurde
NCI-H2052
Kude
Pleuraefusioon
Haigus
Pleura sarkomatoidne mesotelioom
Sünonüümid
H2052, H-2052, H2052_MM, NCIH2052

Dokumendid

NCI-H2052

Cell line · Toote number 305836

NCI-H2052 is a human mesothelioma cell line derived from a pleural biopsy specimen of an adult patient diagnosed with malignant mesothelioma. As part of t...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

NCI-H2052 on inimese mesotelioomi rakuliin, mis on saadud täiskasvanud patsiendi pleura biopsiaproovist, kellel on diagnoositud pahaloomuline mesotelioom. NCI-Navy Medical Oncology Branch'i rakuliinide paneeli osana on seda laialdaselt kasutatud mesotelioomiuuringutes tänu selle reprodutseeritavatele kasvutunnustele ja määratletud histoloogilisele päritolule. Rakuliin loodi IRB poolt heakskiidetud protokollide alusel, mille eesmärk on luua kliiniliselt kommenteeritud vähimudelid, mis teeb selle eriti väärtuslikuks translatsioonilistes uuringutes, mis seovad in vitro käitumise patsiendi haiguse omadustega.

Fenotüübiliselt on NCI-H2052-l epiteliaalne morfoloogia, mis vastab mesotelioomi epitelioidsele alatüübile. Rakud kasvavad in vitro adherentsete monokihidena ja neid hoitakse RPMI-1640 keskkonnas, millele on lisatud 10% veise loote seerumit. Genoomilise profiili analüüsimisel on tuvastatud mesotelioomile iseloomulikud muutused, sealhulgas CDKN2A ja NF2 sisaldavate radade düsregulatsioon, kuigi NCI-H2052 säilitab spetsiifiliselt metsikut tüüpi BAP1 ja näitab suhteliselt madalat mutatsioonikoormust võrreldes teiste mesotelioomimudelitega. Need molekulaarsed tunnused asetavad NCI-H2052 võrdlusmudeliks mesotelioomi patogeneesi ja ravivastuse uurimiseks, eriti kontekstides, mis välistavad BAP1 poolt põhjustatud fenotüübid.

See rakuliin on lisatud ulatuslikesse farmakogenoomiliste ja transkriptoomiliste andmete kogumitesse, kus see aitab kaasa mesotelioomi alatüüpide ja terapeutilise tundlikkuse võrdlevale analüüsile. See on näidanud mõõdukat tundlikkust PI3K/mTOR-teljele suunatud ainete suhtes ning seda on kasutatud kõrge läbilaskevõimega sõeluuringuplatvormides, et tuvastada võimalikke sünteetilisi letaalseid koostoimeid ja uusi raviviise. Oma molekulaarse profiili ja päritolu tõttu on NCI-H2052 endiselt mesotelioomi ravimite arendamise ja molekulaarse iseloomustuse uuringute nurgakivi.

Kude
Pleuraefusioon
Haigus
Pleura sarkomatoidne mesotelioom
Sünonüümid
  • H2052
  • H-2052
  • H2052_MM
  • NCIH2052

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Rakutüüp
Epiteelilaadne
Kahekordistumisaeg
48 tundi

04Tunnused

Viide
NCI-H2052 (Cytioni katalooginumber 305836)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1518

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: CDKN2A, homosügootne. Geeni deletsioon, LATS2, homosügootne. Mutatsioon, NF2, Simple, p.Arg341Ter (c.1021C>T), homosügootne, RASSF2, Simple, p.Glu294Ter (c.880G>T), heterosügootne, TERT, Simple, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T), määramata, Märkus=Promootoris (PubMed=31068700)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
65 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia