NCI-H2052

A NCI-H2052 é uma linha celular de mesotelioma humano derivada de uma amostra de biopsia pleural de um doente adulto a quem foi diagnosticado mesotelioma maligno. Fazendo parte do painel de linhas celulares do NCI-Navy Medical Oncology Branch, tem sido amplamente utilizada na investigação do mesotelioma devido às suas caraterísticas de crescimento reprodutíveis e à sua origem histológica definida. A linha celular foi estabelecida ao abrigo de protocolos aprovados pelo IRB destinados a gerar modelos de cancro clinicamente anotados, o que a torna particularmente valiosa para estudos de translação que relacionem o comportamento in vitro com as caraterísticas das doenças dos doentes.

Fenotipicamente, a NCI-H2052 apresenta uma morfologia epitelial, uma caraterística consistente com o subtipo epitelioide do mesotelioma. As células crescem como monocamadas aderentes in vitro e são mantidas em meio RPMI-1640 suplementado com 10% de soro fetal bovino. O perfil genómico identificou alterações caraterísticas do mesotelioma, incluindo a desregulação das vias que envolvem CDKN2A e NF2, embora o NCI-H2052 retenha especificamente BAP1 de tipo selvagem e apresente uma carga de mutação relativamente baixa em comparação com outros modelos de mesotelioma. Estas caraterísticas moleculares posicionam a NCI-H2052 como um modelo de referência para o estudo da patogénese do mesotelioma e da resposta terapêutica, especialmente em contextos que excluem os fenótipos induzidos por BAP1.

Esta linha celular foi incorporada em conjuntos de dados farmacogenómicos e transcriptómicos abrangentes, onde contribui para a análise comparativa dos subtipos de mesotelioma e das sensibilidades terapêuticas. Demonstrou uma reatividade moderada a agentes que visam o eixo PI3K/mTOR e tem sido utilizada em plataformas de rastreio de elevado rendimento para identificar potenciais interações letais sintéticas e novas abordagens terapêuticas. Devido ao seu perfil molecular e à sua origem, o NCI-H2052 continua a ser uma pedra angular no desenvolvimento de medicamentos para o mesotelioma e nos estudos de caraterização molecular.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia