Pāriet uz saturu
NCI-H2052
Audums
Pleiras izsvīdums
Slimība
Pleiras sarkomatoīdā mezotelioma
Sinonīmi
H2052, H-2052, H2052_MM, NCIH2052

Dokumenti

NCI-H2052

Cell line · Preces numurs 305836

NCI-H2052 is a human mesothelioma cell line derived from a pleural biopsy specimen of an adult patient diagnosed with malignant mesothelioma. As part of t...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

NCI-H2052 ir cilvēka mezoteliomas šūnu līnija, kas iegūta no pleiras biopsijas parauga pieaugušam pacientam, kam diagnosticēta ļaundabīga mezotelioma. Tā ir daļa no NCI-Navy Medical Oncology Branch šūnu līniju paneļa un ir plaši izmantota mezoteliomas pētījumos, jo tai ir reproducējamas augšanas īpašības un noteikta histoloģiskā izcelsme. Šūnu līnija tika izveidota saskaņā ar IRB apstiprinātiem protokoliem, kuru mērķis ir radīt klīniski anotētiskus vēža modeļus, tāpēc tā ir īpaši vērtīga translatoloģiskiem pētījumiem, kas saista in vitro uzvedību ar pacientu slimības īpašībām.

Fenotipiski NCI-H2052 piemīt epitēlija morfoloģija, kas atbilst mezoteliomas epitēlioīdam apakštipam. Šūnas in vitro aug kā adherenti monoslāņi un tiek uzturētas RPMI-1640 barotnē, kas papildināta ar 10 % liellopu fetālā seruma. Genomiskajā profilēšanā ir konstatētas mezoteliomai raksturīgas izmaiņas, tostarp CDKN2A un NF2 ceļu disregulācija, lai gan NCI-H2052 saglabā savvaļas tipa BAP1 un uzrāda salīdzinoši zemu mutāciju slogu salīdzinājumā ar citiem mezoteliomas modeļiem. Šīs molekulārās iezīmes ļauj NCI-H2052 izmantot kā etalonmodeli mezoteliomas patoģenēzes un terapeitiskās atbildes reakcijas izpētei, jo īpaši saistībā ar fenotipiem, kas neietver BAP1 izraisītu fenotipu.

Šī šūnu līnija ir iekļauta visaptverošās farmakogenomikas un transkriptomikas datu kopās, kur tā palīdz veikt mezoteliomu apakštipu un terapeitiskās jutības salīdzinošo analīzi. Tā ir pierādījusi mērenu atsaucību pret līdzekļiem, kas vērsti pret PI3K/mTOR asi, un ir izmantota augstas izšķirtspējas skrīninga platformās, lai noteiktu potenciālās sintētiskās letālās mijiedarbības un jaunas ārstēšanas pieejas. Pateicoties tā molekulārajam profilam un izcelsmei, NCI-H2052 joprojām ir stūrakmens mezoteliomas zāļu izstrādē un molekulārās raksturošanas pētījumos.

Audums
Pleiras izsvīdums
Slimība
Pleiras sarkomatoīdā mezotelioma
Sinonīmi
  • H2052
  • H-2052
  • H2052_MM
  • NCIH2052

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Šūnu tips
Epitēlijveida
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
48 stundas

04Identifikatori

Atsauce
NCI-H2052 (Cytion kataloga numurs 305836)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1518

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: CDKN2A, homozigotiska. Gēnu delecija, LATS2, homozigotiska. Mutācija, NF2, vienkārša, p.Arg341Ter (c.1021C>T), homozigotiska, RASSF2, vienkārša, p.Glu294Ter (c.880G>T), heterozigotiska, TERT, vienkārša, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T), neprecizēta, Piezīme = promotērā (PubMed=31068700)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
65 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis