Siirry sisältöön
NCI-H2052
Kudos
Pleuraeffuusio
Sairaus
Pleuran sarkomatoidinen mesoteliooma
Synonyymit
H2052, H-2052, H2052_MM, NCIH2052

Asiakirjat

NCI-H2052

Cell line · Tuotenumero 305836

NCI-H2052 is a human mesothelioma cell line derived from a pleural biopsy specimen of an adult patient diagnosed with malignant mesothelioma. As part of t...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

NCI-H2052 on ihmisen mesotelioomasolulinja, joka on peräisin pahanlaatuista mesotelioomaa sairastavan aikuispotilaan pleura-biopsianäytteestä. Se on osa NCI-Navy Medical Oncology Branchin solulinjapaneelia, ja sitä on hyödynnetty laajalti mesotelioomatutkimuksessa sen toistettavien kasvuominaisuuksien ja määritellyn histologisen alkuperän vuoksi. Solulinja perustettiin IRB:n hyväksymien pöytäkirjojen mukaisesti, joiden tarkoituksena on tuottaa kliinisesti merkittyjä syöpämalleja, mikä tekee siitä erityisen arvokkaan translaatiotutkimuksissa, joissa in vitro -käyttäytyminen yhdistetään potilaan sairauden ominaisuuksiin.

Fenotyyppisesti NCI-H2052:lla on epiteliaalinen morfologia, joka vastaa mesoteliooman epitelioidista alatyyppiä. Solut kasvavat in vitro tarttuvina monokerroksina, ja niitä ylläpidetään RPMI-1640-mediassa, jota on täydennetty 10 %:lla naudan sikiöseerumilla. Genomiprofiloinnissa on havaittu mesotelioomalle tyypillisiä muutoksia, mukaan lukien CDKN2A:n ja NF2:n sisältämien reittien säätelyhäiriöt, vaikka NCI-H2052-soluissa säilyy nimenomaan villityyppinen BAP1, ja mutaatiorasitus on muihin mesotelioomamalleihin verrattuna suhteellisen alhainen. Näiden molekyylipiirteiden ansiosta NCI-H2052 on vertailumalli mesoteliooman patogeneesin ja hoitovasteen tutkimiseen, erityisesti tilanteissa, joissa BAP1:n aiheuttamia fenotyyppejä ei esiinny.

Tämä solulinja on sisällytetty kattaviin farmakogenomisiin ja transkriptomisiin tietokokonaisuuksiin, joissa se edistää mesoteliooman alatyyppien ja terapeuttisen herkkyyden vertailevaa analyysia. Se on osoittanut kohtalaista herkkyyttä PI3K/mTOR-akseliin kohdistuville aineille, ja sitä on käytetty korkean läpimenon seulonta-alustoissa mahdollisten synteettisten tappavien vuorovaikutusten ja uusien hoitokeinojen tunnistamiseksi. Molekyyliprofiilinsa ja alkuperänsä vuoksi NCI-H2052 on edelleen mesoteliooman lääkekehityksen ja molekyylitutkimusten kulmakivi.

Kudos
Pleuraeffuusio
Sairaus
Pleuran sarkomatoidinen mesoteliooma
Synonyymit
  • H2052
  • H-2052
  • H2052_MM
  • NCIH2052

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli
Solutyyppi
Epiteelin kaltainen
Kaksinkertaistumisaika
48 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
NCI-H2052 (Cytionin luettelonumero 305836)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_1518

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Mutaatio: CDKN2A, homotsygoottinen. Geenin deleetio, LATS2, homotsygoottinen. Mutaatio, NF2, yksinkertainen, p.Arg341Ter (c.1021C>T), homotsygoottinen, RASSF2, yksinkertainen, p.Glu294Ter (c.880G>T), heterotsygoottinen, TERT, yksinkertainen, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T), määrittelemätön, Huomautus=Promoottorissa (PubMed=31068700)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
65 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen