4T1-GFP

La lignée 4T1-GFP est un dérivé génétiquement modifié de la lignée cellulaire murine 4T1 de carcinome mammaire qui exprime de manière constitutive la protéine fluorescente verte (GFP), ce qui permet la visualisation et le suivi en temps réel des cellules tumorales in vitro et in vivo. La lignée parentale 4T1 provient à l’origine d’une tumeur mammaire apparue spontanément chez une souris BALB/c et est caractérisée comme un modèle de cancer du sein triple négatif hautement tumorigène. Lorsqu’elles sont injectées de manière orthotopique dans le coussinet adipeux mammaire de souris BALB/c syngéniques immunocompétentes, les cellules 4T1 forment des tumeurs primaires agressives qui métastasent spontanément vers les poumons, le foie, les ganglions lymphatiques et les os, reproduisant ainsi fidèlement la progression d’un cancer du sein humain de stade IV. Il est à noter que le modèle 4T1 s’est avéré capable de produire des métastases osseuses ostéolytiques après implantation orthotopique, ce qui en fait un modèle cliniquement pertinent pour l’étude de la dissémination du cancer du sein et de la colonisation squelettique.

Le marquage des cellules 4T1 par la GFP permet une détection sensible des tumeurs primaires, des cellules tumorales circulantes et des foyers métastatiques à l’aide de la microscopie à fluorescence, de la cytométrie en flux et de systèmes d’imagerie in vivo. Cela facilite l’évaluation quantitative de la charge métastatique, l’imagerie intravitale de la dynamique des cellules tumorales et le suivi des interactions entre les cellules tumorales et le stroma ou entre les cellules tumorales et les cellules immunitaires. Dans les modèles orthotopiques et intracardiaques, les dérivés de la lignée 4T1 exprimant la GFP permettent une identification précise des cellules tumorales au sein de la moelle osseuse, du parenchyme pulmonaire et d’autres sites métastatiques, surmontant ainsi les limites de la détection histologique seule. La lignée parentale 4T1 conservant des interactions immunogéniques intactes chez les hôtes syngéniques BALB/c, la lignée 4T1-GFP est particulièrement adaptée aux études portant sur la modulation immunitaire, le remodelage du microenvironnement tumoral et la formation de niches métastatiques dans des conditions d’immunocompétence totale.

Sur le plan moléculaire, les cellules 4T1 présentent les caractéristiques d’un carcinome mammaire agressif de type mésenchymateux, notamment une forte capacité d’invasion, une résistance à l’anoïkise et une capacité métastatique robuste. Il a été rapporté que des variants et sous-clones de la lignée 4T1 présentent des profils différentiels de tropisme métastatique et d’expression des chimiokines, tels qu’une production accrue de CCL4 chez les dérivés à tropisme osseux, ce qui souligne l’utilité de ce modèle pour disséquer les mécanismes de métastases spécifiques à certains organes. En tant que contrepartie traçable par fluorescence de ce système métastatique bien établi, la lignée 4T1-GFP offre une puissante plateforme pour la recherche quantitative sur les métastases, les tests d’efficacité thérapeutique, les études d’immuno-oncologie, ainsi que l’analyse de la dissémination des cellules tumorales et de la cinétique de colonisation in vivo.

Modification génétique : modifiée de manière stable par transduction lentivirale à réplication incompétente pour exprimer le rapporteur protéique fluorescent vert ZsGreen1 ; maintenue sous forme de population polyclonale sous sélection à la puromycine (1–5 µg/mL). Confinement S1/BSL-1.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie