4T1-GFP

4T1-GFP on hiiren 4T1-rintasyöpäsolulinjan geneettisesti muunnettu johdannainen, joka ilmentää jatkuvasti vihreää fluoresoivaa proteiinia (GFP), mikä mahdollistaa kasvainsolujen reaaliaikaisen visualisoinnin ja seurannan sekä in vitro että in vivo. Alkuperäinen 4T1-linja on peräisin BALB/c-hiiren spontaanisti syntyneestä rintasyövästä, ja se on luokiteltu erittäin tuumorigeeniseksi, kolminkertaisesti negatiiviseksi rintasyöpämalliksi. Kun 4T1-soluja injektoidaan ortotopisesti syngeneisten, immuunivastekykyisten BALB/c-hiirten rintarauhasten rasvakudokseen, ne muodostavat aggressiivisia primaarikasvaimia, jotka metastaasoituvat spontaanisti keuhkoihin, maksaan, imusolmukkeisiin ja luihin, mikä jäljittelee tarkasti ihmisen rintasyövän vaiheen IV etenemistä. Erityisesti on osoitettu, että 4T1-malli tuottaa ortotopisen istutuksen jälkeen osteolyyttisiä luumetastaaseja, mikä tekee siitä kliinisesti merkittävän mallin rintasyövän leviämisen ja luustoon asettumisen tutkimiseen.

4T1-solujen GFP-merkintä mahdollistaa primaarikasvainten, verenkierrossa olevien kasvainsolujen ja etäpesäkkeiden herkän havaitsemisen fluoresenssimikroskopian, virtaussytometrian ja in vivo -kuvantamisjärjestelmien avulla. Tämä helpottaa etäpesäkkeiden määrän kvantitatiivista arviointia, kasvainsolujen dynamiikan intravitaalista kuvantamista sekä kasvain-stroma- tai kasvain-immuunisolujen vuorovaikutusten seurantaa. Ortotopisissa ja intrakardiaalisissa malleissa GFP:tä ilmentävät 4T1-johdannaiset mahdollistavat kasvainsolujen tarkan tunnistamisen luuytimessä, keuhkoparenkyymissä ja muissa metastaasikohdissa, mikä ylittää pelkän histologisen havaitsemisen rajoitukset. Koska emolinja 4T1 säilyttää ehjät immunogeeniset vuorovaikutukset syngeneisissä BALB/c-isäntäeläimissä, 4T1-GFP sopii erityisen hyvin tutkimuksiin, joissa selvitetään immuunimodulaatiota, kasvaimen mikroympäristön uudelleenmuodostumista ja metastaattisen pesän muodostumista täysin immuunitoiminnaltaan ehjissä olosuhteissa.

Molekyylitasolla 4T1-solut osoittavat aggressiivisen, mesenkymaalisen rintasyövän piirteitä, mukaan lukien korkea invasiivisuus, vastustuskyky anoikikselle ja vahva metastaattinen kyky. 4T1-varianttien ja alikloonien on raportoitu osoittavan erilaista metastaattista tropismia ja kemokiinien ilmentymisprofiileja, kuten lisääntynyttä CCL4-tuotantoa luutropisissa johdannaisissa, mikä korostaa mallin hyödyllisyyttä elinkohtaisten metastaasimekanismien selvittämisessä. Tämän vakiintuneen metastaattisen järjestelmän fluoresoivasti jäljitettävänä vastineena 4T1-GFP tarjoaa tehokkaan alustan kvantitatiiviseen metastaasitutkimukseen, hoidon tehokkuuden testaamiseen, immuuni-onkologisiin tutkimuksiin sekä kasvainsolujen leviämisen ja kolonisaation kinetiikan analysointiin in vivo.

Geneettinen muuntelu: Vakaasti muunnettu replikaatiokyvytön lentiviruksen välityksellä ilmentämään ZsGreen1-vihreää fluoresoivaa proteiinireportteria; ylläpidetään polyklonaalisena populaationa puromysiiniselektiossa (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-turvaluokitus.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa