4T1-GFP

4T1-GFP הוא נגזרת מהונדסת גנטית של קו התאים 4T1 של קרצינומה בשד בעכברים, המבטאת באופן קבוע חלבון פלואורסצנטי ירוק (GFP), מה שמאפשר הדמיה ומעקב בזמן אמת אחר תאי הגידול במבחנה ובגוף החי. קו ה-4T1 ההורי נגזר במקור מגידול בשד שהתפתח באופן ספונטני בעכבר מסוג BALB/c, והוא מאופיין כמודל לסרטן השד בעל פוטנציאל גידולי גבוה, המשתייך לקטגוריה של "משולש שלילי". כאשר מוזרקים תאי 4T1 באופן אורתוטופי לרקמת השומן השדית של עכברי BALB/c סינגניים בעלי מערכת חיסונית תקינה, הם יוצרים גידולים ראשוניים אגרסיביים המתפשטים באופן ספונטני לריאות, לכבד, לבלוטות הלימפה ולעצמות, ובכך משחזרים באופן מדויק את התקדמות סרטן השד האנושי בשלב IV. יש לציין כי הוכח שמודל ה-4T1 מייצר גרורות עצמות אוסטאוליטיות בעקבות השתלה אורתוטופית, מה שהופך אותו למודל רלוונטי קלינית לחקר התפשטות סרטן השד והתיישבותו במערכת השלד.

סימון תאי 4T1 ב-GFP מאפשר זיהוי רגיש של גידולים ראשוניים, תאים סרטניים במחזור הדם ומוקדי גרורות באמצעות מיקרוסקופיה פלואורסצנטית, ציטומטריית זרימה ומערכות הדמיה in vivo. הדבר מאפשר הערכה כמותית של העומס הגרורתי, הדמיה תוך-חייתית של הדינמיקה של תאי הגידול ומעקב אחר אינטראקציות בין תאי הגידול לסטרומה או בין תאי הגידול לתאי המערכת החיסונית. במודלים אורתוטופיים ובתוך-לבביים, נגזרות של 4T1 המבטאות GFP מאפשרות זיהוי מדויק של תאי גידול בתוך מח העצם, פרנכימת הריאה ואתרי גרורות אחרים, ובכך מתגברות על המגבלות של זיהוי היסטולוגי בלבד. מכיוון שקו ה-4T1 ההורי שומר על אינטראקציות אימונוגניות שלמות במארחים סינגניים מסוג BALB/c, 4T1-GFP מתאים במיוחד למחקרים הבוחנים ויסות חיסוני, שינוי מיקרו-סביבת הגידול ויצירת נישה גרורתית בתנאים של תפקוד חיסוני מלא.

מבחינה מולקולרית, תאי 4T1 מפגינים מאפיינים של קרצינומה אגרסיבית של השד, הדומה למזנכימלית, כולל פולשנות גבוהה, עמידות לאנויקיס ויכולת גרורתית חזקה. דווח כי וריאנטים ותת-קלונים של 4T1 מפגינים טרופיזם גרורתי דיפרנציאלי ופרופילי ביטוי כימוקינים שונים, כגון ייצור מוגבר של CCL4 בנגזרות בעלות נטייה לעצמות, מה שמדגיש את התועלת של המודל בניתוח מנגנוני גרורות ספציפיים לאיברים. כמקבילה הניתנת למעקב באמצעות פלואורסצנציה של מערכת גרורתית מבוססת זו, 4T1-GFP מספקת פלטפורמה עוצמתית למחקר כמותי של גרורות, בדיקת יעילות טיפולית, מחקרים בתחום האימונו-אונקולוגיה, וניתוח התפשטות תאי הגידול וקינטיקת ההתיישבות in vivo.

שינוי גנטי: עבר שינוי יציב באמצעות העברה לנטרווירוס שאינו מסוגל לשכפל את עצמו, כדי לבטא את הרפורט של החלבון הזוהר הירוק ZsGreen1; נשמר כאוכלוסייה פוליקלונלית תחת סלקציה של פורומיצין (1–5 µg/mL). רמת בטיחות S1/BSL-1.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו