4T1-GFP

4T1-GFP — це генетично модифікований похідний штам мишачої клітинної лінії карциноми молочної залози 4T1, який постійно експресує зелений флуоресцентний білок (GFP), що дозволяє візуалізувати та відстежувати пухлинні клітини в режимі реального часу як in vitro, так і in vivo. Базова лінія 4T1 була спочатку отримана зі спонтанно виниклої пухлини молочної залози у миші BALB/c і характеризується як високоонкогенна модель потрійно-негативного раку молочної залози. При ортотопічному введенні в молочну жирову подушку сингенних імунокомпетентних мишей BALB/c клітини 4T1 утворюють агресивні первинні пухлини, які спонтанно метастазують у легені, печінку, лімфатичні вузли та кістки, що дуже точно відтворює прогресування раку молочної залози IV стадії у людини. Варто зазначити, що, як було показано, модель 4T1 утворює остеолітичні кісткові метастази після ортотопічної імплантації, що робить її клінічно значущою моделлю для вивчення поширення раку молочної залози та колонізації скелета.

Маркування клітин 4T1 геном GFP дозволяє чутливо виявляти первинні пухлини, циркулюючі пухлинні клітини та метастатичні вогнища за допомогою флуоресцентної мікроскопії, проточної цитометрії та систем візуалізації in vivo. Це полегшує кількісну оцінку метастатичного навантаження, інтравітальну візуалізацію динаміки пухлинних клітин та відстеження взаємодій між пухлинними клітинами та стромальними або імунними клітинами. В ортотопічних та інтракардіальних моделях похідні клітин 4T1, що експресують GFP, дозволяють точно ідентифікувати пухлинні клітини в кістковому мозку, паренхімі легенів та інших місцях метастазування, долаючи обмеження, пов’язані з використанням виключно гістологічного виявлення. Оскільки батьківська лінія 4T1 зберігає незмінні імуногенні взаємодії в сингенних хазяїнах BALB/c, 4T1-GFP особливо підходить для досліджень, присвячених імунній модуляції, ремоделюванню мікросередовища пухлини та формуванню метастатичної ніші в умовах повної імунокомпетентності.

З молекулярної точки зору клітини 4T1 демонструють ознаки агресивної, мезенхімальноподібної карциноми молочної залози, включаючи високу інвазивність, резистентність до аноїкісу та потужну здатність до метастазування. Повідомлялося, що варіанти та субклони 4T1 демонструють різний метастатичний тропізм та профілі експресії хемокінів, наприклад, підвищене вироблення CCL4 у похідних з кістковим тропізмом, що підкреслює корисність цієї моделі для аналізу механізмів органоспецифічного метастазування. Як флуоресцентно відстежуваний аналог цієї усталеної метастатичної системи, 4T1-GFP забезпечує потужну платформу для кількісних досліджень метастазування, тестування терапевтичної ефективності, досліджень в галузі імуноонкології, а також аналізу кінетики поширення та колонізації пухлинних клітин in vivo.

Генетична модифікація: Стабільно модифікована шляхом реплікаційно-некомпетентної лентивірусної трансдукції для експресії репортерного білка зеленої флуоресценції ZsGreen1; утримується у вигляді поліклональної популяції під селекцією пуроміцином (1–5 мкг/мл). Рівень біобезпеки S1/BSL-1.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>