4T1-GFP

4T1-GFP on hiire 4T1 rinnavähi rakuliini geneetiliselt muundatud derivaat, mis ekspresseerib pidevalt rohelist fluorestsentsvalku (GFP), võimaldades kasvajarakkude reaalajas visualiseerimist ja jälgimist nii in vitro kui ka in vivo. Algrida 4T1 pärineb algselt BALB/c hiire spontaanselt tekkinud rinnavähist ning seda iseloomustab tugev tuumorigeensus ja see on kolmekordselt negatiivne rinnavähi mudel. Kui 4T1-rakke süstitakse ortotopiliselt süngeneetsete immuunkompetentsete BALB/c hiirte rinnarasvkoesse, moodustavad need agressiivsed primaartuumorid, mis metastaasid spontaanselt kopsudesse, maksa, lümfisõlmedesse ja luudesse, jäljendades täpselt IV staadiumi inimese rinnavähi progresseerumist. Tähelepanuväärne on asjaolu, et 4T1-mudel tekitab ortotopilise siirdamise järel osteolüütilisi luumetastaase, mis teeb sellest kliiniliselt asjakohase mudeli rinnavähi leviku ja luustiku koloniseerumise uurimiseks.

4T1-rakkude GFP-märgistamine võimaldab primaartuumorite, ringlevate kasvajarakkude ja metastaatiliste fookuste tundlikku avastamist, kasutades fluorestsentsmikroskoopiat, voolutsütomeetriat ja in vivo pildistamissüsteeme. See hõlbustab metastaatilise koormuse kvantitatiivset hindamist, kasvajarakkude dünaamika intravitaalset pildistamist ning kasvaja-strooma või kasvaja-immuunrakkude vastastikmõju jälgimist. Ortotopilistes ja intrakardiaalsetes mudelites võimaldavad GFP-d ekspresseerivad 4T1-derivaadid täpselt identifitseerida kasvajarakke luuüdis, kopsuparenhüümis ja muudes metastaatilistes paikades, ületades üksnes histoloogilise tuvastamise piirangud. Kuna algne 4T1-liin säilitab süngeneetsetes BALB/c peremeesorganismides puutumatud immunogeensed interaktsioonid, sobib 4T1-GFP eriti hästi uuringuteks, mis käsitlevad immuunmodulatsiooni, kasvaja mikrokeskkonda ümberkujundamist ja metastaatilise niši moodustumist täielikult immuunkompetentsetes tingimustes.

Molekulaarsel tasandil ilmutavad 4T1-rakud agressiivse, mesenküümilaadse rinnavähi tunnuseid, sealhulgas suurt invasiivsust, vastupidavust anoikisele ja tugevat metastaasivõimet. On teatatud, et 4T1 variandid ja subkloonid ilmutavad erinevat metastaatilist tropismi ja kemokiinide ekspressiooniprofiile, näiteks suurenenud CCL4 tootmist luutroopsetes derivaatides, mis rõhutab mudeli kasulikkust organspetsiifiliste metastaasimekanismide analüüsimisel. Selle väljakujunenud metastaaside süsteemi fluorestsentsiga jälgitava vastena pakub 4T1-GFP võimast platvormi kvantitatiivseks metastaaside uurimiseks, ravi tõhususe testimiseks, immuunonkoloogilisteks uuringuteks ning kasvajarakkude leviku ja koloniseerumise kineetika analüüsiks in vivo.

Geneetiline modifikatsioon: stabiilselt modifitseeritud replikatsioonivõimetu lentiviiruse transduktsiooni abil, et ekspresseerida rohelist fluorestsentsvalku ZsGreen1; hoitakse polükloonilise populatsioonina puromütsiini selektsiooni all (1–5 µg/mL). S1/BSL-1 ohutustase.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest