4T1-GFP

4T1-GFP, fare 4T1 meme karsinomu hücre hattının genetik olarak modifiye edilmiş bir türevidir ve yeşil floresan proteini (GFP) sürekli olarak eksprese eder; bu sayede in vitro ve in vivo ortamlarda tümör hücrelerinin gerçek zamanlı olarak görüntülenmesi ve izlenmesi mümkün olur. Ana 4T1 hattı, başlangıçta bir BALB/c faresinde kendiliğinden ortaya çıkan bir meme tümöründen türetilmiştir ve yüksek tümör oluşturma potansiyeline sahip, üçlü negatif bir meme kanseri modeli olarak nitelendirilmektedir. Singeneik immünokompetan BALB/c farelerinin meme yağ yastığına ortotopik olarak enjekte edildiğinde, 4T1 hücreleri, akciğer, karaciğer, lenf düğümleri ve kemiğe kendiliğinden metastaz yapan agresif birincil tümörler oluşturur ve bu durum, evre IV insan meme kanseri ilerlemesini yakından yansıtır. Özellikle, 4T1 modelinin ortotopik implantasyonun ardından osteolitik kemik metastazları oluşturduğu gösterilmiştir; bu da onu meme kanserinin yayılımını ve iskelet kolonizasyonunu incelemek için klinik açıdan önemli bir model haline getirmektedir.

4T1 hücrelerinin GFP ile işaretlenmesi, floresan mikroskopi, akış sitometrisi ve in vivo görüntüleme sistemleri kullanılarak birincil tümörlerin, dolaşımdaki tümör hücrelerinin ve metastatik odakların hassas bir şekilde tespit edilmesini sağlar. Bu, metastatik yükün kantitatif değerlendirmesini, tümör hücresi dinamiklerinin intravital görüntülenmesini ve tümör-stromal veya tümör-bağışıklık hücresi etkileşimlerinin izlenmesini kolaylaştırır. Ortotopik ve intrakardiyak modellerde, GFP eksprese eden 4T1 türevleri, kemik iliği, akciğer parankimi ve diğer metastatik bölgeler içindeki tümör hücrelerinin kesin olarak tanımlanmasına olanak tanıyarak, yalnızca histolojik saptamanın sınırlamalarını ortadan kaldırır. Ana 4T1 suşu, singenik BALB/c konakçılarda immünojenik etkileşimlerini bozulmadan koruduğundan, 4T1-GFP, tam immün yetkinlik koşulları altında immün modülasyonu, tümör mikroçevresinin yeniden şekillenmesini ve metastatik niş oluşumunu araştıran çalışmalar için özellikle uygundur.

Moleküler açıdan, 4T1 hücreleri yüksek invazivlik, anoikise direnç ve güçlü metastatik yetenek dahil olmak üzere agresif, mezenkimal benzeri meme karsinomunun özelliklerini sergiler. 4T1’in varyantları ve alt klonlarının, kemik tropik türevlerde artmış CCL4 üretimi gibi farklı metastatik tropizm ve kemokin ekspresyon profilleri sergilediği bildirilmiştir; bu da modelin organa özgü metastaz mekanizmalarını incelemede ne kadar yararlı olduğunu vurgulamaktadır. Bu yerleşik metastatik sistemin floresanla izlenebilir bir karşılığı olan 4T1-GFP, kantitatif metastaz araştırmaları, terapötik etkinlik testleri, immüno-onkoloji çalışmaları ve in vivo tümör hücresi yayılımı ile kolonizasyon kinetiğinin analizi için güçlü bir platform sunar.

Genetik modifikasyon: ZsGreen1 yeşil floresan protein raportörünü eksprese etmek üzere replikasyon yeteneği olmayan lentiviral transdüksiyon yoluyla stabil bir şekilde modifiye edilmiştir; puromisin seleksiyonu (1–5 µg/mL) altında poliklonal bir popülasyon olarak muhafaza edilir. S1/BSL-1 güvenlik seviyesinde tutulur.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın