4T1-GFP

4T1-GFP yra genetiškai modifikuotas pelių 4T1 pieno liaukos karcinomos ląstelių linijos darinys, kuriame nuolat ekspresuojamas žalias fluorescuojantis baltymas (GFP), leidžiantis realiuoju laiku stebėti ir sekti naviko ląsteles in vitro ir in vivo. Pirminė 4T1 linija buvo išskirta iš spontaniškai atsiradusio krūties naviko BALB/c pelėje ir apibūdinama kaip labai onkogeninis, trigubai neigiamas krūties vėžio modelis. Kai 4T1 ląstelės ortotopiškai įšvirkščiamos į singeninių imunokompetentingų BALB/c pelių pieno liaukų riebalinį audinį, jos suformuoja agresyvius pirminius navikus, kurie savaime metastazuoja į plaučius, kepenis, limfmazgius ir kaulus, labai tiksliai atkartodami IV stadijos žmogaus krūties vėžio progresavimą. Pažymėtina, kad buvo įrodyta, jog 4T1 modelis po ortotopinio implantavimo sukelia osteolitines kaulų metastazes, todėl jis yra klinikiškai reikšmingas modelis krūties vėžio išplitimo ir kaulų kolonizacijos tyrimams.

4T1 ląstelių žymėjimas GFP leidžia jautriai aptikti pirminius navikus, cirkuliuojančias naviko ląsteles ir metastazinius židinius naudojant fluorescencinę mikroskopiją, srauto citometriją ir in vivo vaizdinimo sistemas. Tai palengvina metastazinio krūvio kiekybinį įvertinimą, naviko ląstelių dinamikos intravitalinį vaizdinimą ir naviko-stromos arba naviko-imuninių ląstelių sąveikų stebėjimą. Ortotopiniuose ir intrakardininiuose modeliuose GFP ekspresuojantys 4T1 dariniai leidžia tiksliai identifikuoti naviko ląsteles kaulų čiulpuose, plaučių parenchimoje ir kitose metastazėse, taip įveikiant vien tik histologinio aptikimo ribotumus. Kadangi pirminė 4T1 linija išlaiko nepakitusias imunogenines sąveikas singeniniuose BALB/c šeimininkuose, 4T1-GFP ypač tinka tyrimams, kuriuose nagrinėjama imuninė moduliacija, naviko mikroaplinkos pertvarkymas ir metastazinių nišų formavimasis visiškai imunokompetentingomis sąlygomis.

Molekulinės savybės rodo, kad 4T1 ląstelės pasižymi agresyvios, mezenchiminio tipo krūties karcinomos požymiais, įskaitant didelį invazyvumą, atsparumą anoikizei ir stiprų metastazavimo pajėgumą. Buvo pranešta, kad 4T1 variantai ir subklonai pasižymi skirtingu metastaziniu tropizmu ir chemokinų ekspresijos profiliais, pavyzdžiui, padidėjusiu CCL4 gamybos lygiu kaulų tropiniuose derivatuose, o tai pabrėžia šio modelio naudą analizuojant organams būdingus metastazavimo mechanizmus. Kaip fluorescenciniu būdu atsekamas šios pripažintos metastazavimo sistemos atitikmuo, 4T1-GFP suteikia galingą platformą kiekybiniams metastazavimo tyrimams, terapinio veiksmingumo bandymams, imunologinės onkologijos tyrimams bei naviko ląstelių išplitimo ir kolonizacijos kinetikos analizei in vivo.

Genetinė modifikacija: stabiliai modifikuota replikacijos nesugebančiu lentivirusiniu transdukavimu, kad ekspresuotų žalią fluorescuojančio baltymo reporterį ZsGreen1; išlaikoma kaip polikloninė populiacija, atrinkta puromicinu (1–5 µg/mL). S1/BSL-1 saugumo lygis.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime