4T1-GFP

4T1-GFPは、マウス4T1乳腺癌細胞株を遺伝子改変した派生株であり、緑色蛍光タンパク質（GFP）を恒常的に発現するため、in vitroおよびin vivoにおける腫瘍細胞のリアルタイムでの可視化および追跡が可能である。 親株である4T1株は、もともとBALB/cマウスに自然発生した乳腺腫瘍に由来し、高い腫瘍形成能を持つトリプルネガティブ乳がんモデルとして特徴づけられている。 同系免疫能を有する BALB/c マウスの乳腺脂肪組織に同所的に注入すると、4T1 細胞は侵攻性の高い原発腫瘍を形成し、肺、肝臓、リンパ節、骨へ自発的に転移し、ヒトのステージ IV 乳がんの進行を忠実に再現します。 特に、4T1モデルは同所性移植後に骨溶解性骨転移を生じることが示されており、乳がんの播種および骨への定着を研究するための臨床的に意義のあるモデルとなっています。

4T1細胞へのGFP標識により、蛍光顕微鏡、フローサイトメトリー、および生体イメージングシステムを用いて、原発腫瘍、循環腫瘍細胞、および転移巣を高感度で検出することが可能となる。これにより、転移負荷の定量的評価、腫瘍細胞の動態の生体内イメージング、および腫瘍-間質や腫瘍-免疫細胞間の相互作用の追跡が容易になる。 同所性および心内移植モデルにおいて、GFPを発現する4T1派生株を用いることで、骨髄、肺実質、およびその他の転移部位内の腫瘍細胞を正確に同定することが可能となり、組織学的検出のみによる限界を克服できる。 親株である4T1株は、同系BALB/cホストにおいて免疫原性相互作用を損なわずに保持しているため、4T1-GFPは、完全な免疫能を有する条件下での免疫調節、腫瘍微小環境のリモデリング、および転移ニッチの形成を調査する研究に特に適している。

分子レベルでは、4T1細胞は、高い浸潤性、アノイキスに対する抵抗性、強力な転移能など、侵攻性の高い間葉系様乳がんの特徴を示しています。 4T1の変異体やサブクローンは、骨嗜性派生株におけるCCL4産生の増強など、異なる転移性トロピズムやケモカイン発現プロファイルを示すことが報告されており、臓器特異的な転移メカニズムを解明する上で、このモデルの有用性が強調されています。 この確立された転移系に対応する、蛍光追跡可能な株である 4T1-GFP は、定量的転移研究、治療効果試験、免疫腫瘍学研究、および生体内における腫瘍細胞の播種と定着の動態解析のための強力なプラットフォームを提供します。

遺伝子改変：複製不能レンチウイルスによる導入により、ZsGreen1緑色蛍光タンパク質レポーターを発現するよう安定的に改変されている。プロマイシン（1～5 µg/mL）による選択下でポリクローナル集団として維持される。S1/BSL-1レベルの封じ込めレベル。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。