4T1-GFP

A 4T1-GFP az egér 4T1 emlőrákos sejtvonal genetikailag módosított származéka, amely állandóan zöld fluoreszcens fehérjét (GFP) fejez ki, lehetővé téve a tumorsejtek valós idejű vizualizálását és nyomon követését in vitro és in vivo körülmények között. Az eredeti 4T1-vonal eredetileg egy BALB/c egérben spontán kialakult emlődaganatból származik, és rendkívül tumorigenikus, hármas negatív emlőrák-modellként jellemezhető. Amikor ortotóposan szingén immunokompetens BALB/c egerek emlőzsírpárnájába injektálják, a 4T1 sejtek agresszív primer daganatokat képeznek, amelyek spontán módon áttétet képeznek a tüdőben, a májban, a nyirokcsomókban és a csontokban, szorosan leképezve a IV. stádiumú humán emlőrák progresszióját. Érdemes megjegyezni, hogy a 4T1-modellről kimutatták, hogy ortotópos beültetés után osteolitikus csontáttéteket képez, ami klinikailag releváns modellé teszi az emlőrák terjedésének és a csontvázban való megtelepedésének tanulmányozásához.

A 4T1-sejtek GFP-jelölése lehetővé teszi az elsődleges daganatok, a keringő tumorsejtek és a metasztatikus gócok érzékeny kimutatását fluoreszcens mikroszkópiával, áramlási citometriával és in vivo képalkotó rendszerekkel. Ez megkönnyíti a metasztatikus terhelés kvantitatív értékelését, a tumorsejtek dinamikájának intravitális képalkotását, valamint a tumor-stroma vagy a tumor-immunsejt kölcsönhatások nyomon követését. Ortotóp és intrakardiális modellekben a GFP-t expresszáló 4T1-származékok lehetővé teszik a tumorsejtek pontos azonosítását a csontvelőben, a tüdőparenchymában és más metasztatikus helyeken, így leküzdve a kizárólagos szövettani kimutatás korlátait. Mivel az eredeti 4T1-vonal szingén BALB/c gazdaszervezetekben is megőrzi az immunogén kölcsönhatásokat, a 4T1-GFP különösen alkalmas az immunmodulációt, a tumor mikrokörnyezetének átalakulását és a metasztatikus fészek kialakulását vizsgáló kutatásokhoz teljesen immunkompetens körülmények között.

Molekuláris szinten a 4T1-sejtek az agresszív, mezenchimális jellegű emlőrákra jellemző tulajdonságokat mutatnak, ideértve a magas invazivitást, az anoikisz ellenállást és a kiemelkedő metasztatikus képességet. A 4T1 variánsairól és szubklónjairól beszámoltak, hogy eltérő metasztatikus tropizmust és kemokinekifejeződési profilokat mutatnak, például fokozott CCL4-termelést a csont-tropikus származékokban, ami kiemeli a modell hasznosságát a szervspecifikus metasztázismechanizmusok feltárásában. Ennek a bevált metasztatikus rendszernek a fluoreszcens jelöléssel nyomon követhető megfelelőjeként a 4T1-GFP hatékony platformot biztosít a kvantitatív metasztáziskutatáshoz, a terápiás hatékonyság vizsgálatához, az immuno-onkológiai tanulmányokhoz, valamint a tumorsejtek in vivo terjedésének és kolonizációs kinetikájának elemzéséhez.

Genetikai módosítás: Replikációra képtelen lentivirális transzdukcióval stabilan módosítva a ZsGreen1 zöld fluoreszcens fehérje-riporter expressziójára; puromicin-szelekció (1–5 µg/mL) alatt poliklonális populációként tartva. S1/BSL-1 biztonsági besorolás.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban