4T1-GFP

4T1-GFP هو مشتق معدل وراثيًا من سلالة خلايا سرطان الثدي 4T1 الفئرانية، ويُعبِّر بشكل دائم عن البروتين الفلوري الأخضر (GFP)، مما يتيح إمكانية الرؤية والتتبع في الوقت الفعلي للخلايا السرطانية في المختبر وداخل الجسم الحي. وقد استُمد خط الخلايا الأصلي 4T1 في الأصل من ورم ثديي نشأ تلقائيًا في فأر من سلالة BALB/c، ويتميز بكونه نموذجًا لسرطان الثدي ثلاثي السلبية ذي قدرة عالية على تكوين الأورام. عند حقن خلايا 4T1 في موقعها الطبيعي (orthotopically) في الوسادة الدهنية الثديية لفئران BALB/c المتجانسة مناعياً، فإنها تشكل أوراماً أولية عدوانية تنتشر تلقائياً إلى الرئة والكبد والعقد الليمفاوية والعظام، مما يحاكي بشكل وثيق تطور سرطان الثدي البشري في المرحلة الرابعة. والجدير بالذكر أنه ثبت أن نموذج 4T1 ينتج نقائل عظمية آكلة للعظم بعد الزرع في الموقع الطبيعي، مما يجعله نموذجًا ذا صلة سريريًا لدراسة انتشار سرطان الثدي واستعماره للهيكل العظمي.

يتيح وسم خلايا 4T1 ببروتين GFP الكشف الدقيق عن الأورام الأولية والخلايا السرطانية المتداولة والبؤر النقيلية باستخدام المجهر الفلوري وقياس التدفق الخلوي وأنظمة التصوير داخل الجسم الحي. وهذا يسهل التقييم الكمي لحجم النقائل، والتصوير الحي لديناميكيات الخلايا السرطانية، وتتبع التفاعلات بين الخلايا السرطانية والأنسجة الضامة أو الخلايا المناعية. في النماذج الموضعية وداخل القلب، تسمح مشتقات 4T1 التي تعبر عن GFP بالتعرف الدقيق على الخلايا السرطانية داخل نخاع العظم، وحمة الرئة، ومواقع النقائل الأخرى، متجاوزةً بذلك قيود الكشف النسيجي وحده. ونظرًا لأن السلالة الأم 4T1 تحتفظ بتفاعلات مناعية سليمة في المضيفات المتجانسة من سلالة BALB/c، فإن 4T1-GFP مناسبة بشكل خاص للدراسات التي تبحث في تعديل الاستجابة المناعية، وإعادة تشكيل البيئة المحيطة بالورم، وتكوين بيئة النسيج الداعم للانبثاث في ظل ظروف كفاءة مناعية كاملة.

من الناحية الجزيئية، تُظهر خلايا 4T1 سمات سرطان الثدي العدواني الشبيه بالخلايا الوسيطة، بما في ذلك الغزو العالي، ومقاومة «الأنويكيس»، والقدرة القوية على الانتشار. وقد أُبلغ عن أن المتغيرات والنسخ الفرعية لـ 4T1 تُظهر تباينًا في اتجاه الانتشار النقيلي وملامح التعبير عن الكيموكينات، مثل زيادة إنتاج CCL4 في المشتقات التي تنجذب إلى العظام، مما يسلط الضوء على فائدة هذا النموذج في تحليل آليات الانتشار النقيلي الخاصة بالأعضاء. وباعتبارها نظيرًا قابلًا للتتبع بالفلورة لهذا النظام الانتشاري الراسخ، توفر 4T1-GFP منصة قوية لأبحاث الانتشار الكمية، واختبار الفعالية العلاجية، ودراسات علم الأورام المناعي، وتحليل حركيات انتشار الخلايا السرطانية واستيطانها في الجسم الحي.

التعديل الجيني: تم تعديله بشكل مستقر عن طريق نقل لينتيروي فيروسي غير قادر على التكاثر للتعبير عن بروتين ZsGreen1 الفلوري الأخضر المُبلغ؛ ويتم الحفاظ عليه كمجموعة متعددة النسائل تحت انتقاء البوروميسين (1–5 ميكروغرام/مل). احتواء S1/BSL-1.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان