4T1-GFP

4T1-GFP ir ģenētiski modificēts peles 4T1 piena dziedzera karcinomas šūnu līnijas atvasinājums, kas pastāvīgi ekspresē zaļo fluorescējošo proteīnu (GFP), ļaujot reāllaikā vizualizēt un izsekot audzēja šūnām in vitro un in vivo. Sākotnējā 4T1 līnija tika iegūta no spontāni radušā krūts audzēja BALB/c pelē, un to raksturo kā ļoti tumorogēnu, trīskārši negatīvu krūts vēža modeli. Kad 4T1 šūnas ortotopiski injicē singēnisko imūnokompetento BALB/c pelīšu piena dziedzeru tauku slānī, tās veido agresīvus primāros audzējus, kas spontāni metastazē uz plaušām, aknām, limfmezgliem un kauliem, precīzi atainojot IV stadijas cilvēka krūts vēža progresēšanu. Jāatzīmē, ka ir pierādīts, ka 4T1 modelis pēc ortotopiskas implantācijas rada osteolītiskas kaulu metastāzes, tādējādi padarot to par klīniski nozīmīgu modeli krūts vēža izplatības un skeleta kolonizācijas pētīšanai.

4T1 šūnu marķēšana ar GFP ļauj jutīgi noteikt primāros audzējus, cirkulējošās audzēja šūnas un metastāžu perēkļus, izmantojot fluorescences mikroskopiju, plūsmas citometriju un in vivo attēlveidošanas sistēmas. Tas atvieglo metastāžu sloga kvantitatīvo novērtēšanu, audzēja šūnu dinamikas intravitālo attēlveidošanu un audzēja-stromas vai audzēja-imūno šūnu mijiedarbības izsekošanu. Ortotopiskajos un intrakardiālajos modeļos GFP ekspresējošie 4T1 atvasinājumi ļauj precīzi identificēt audzēja šūnas kaulu smadzenēs, plaušu parenhīmā un citās metastāžu vietās, pārvarot tikai histoloģiskās noteikšanas ierobežojumus. Tā kā sākotnējā 4T1 līnija saglabā neskartas imunogēnās mijiedarbības singēniskos BALB/c saimniekos, 4T1-GFP ir īpaši piemērota pētījumiem, kuros izpēta imūnmodulāciju, audzēja mikrovides pārveidošanos un metastātiskās nišas veidošanos pilnībā imūnkompetentos apstākļos.

Molekulārā līmenī 4T1 šūnas uzrāda agresīvas, mezenhimālām līdzīgas krūts karcinomas pazīmes, tostarp augstu invazivitāti, rezistenci pret anoikīzi un spēcīgu metastāzēšanas spēju. Ir ziņots, ka 4T1 variantiem un subkloniem piemīt atšķirīgs metastāžu tropisms un ķīmisko signālvielu ekspresijas profili, piemēram, paaugstināta CCL4 ražošana kaulu-tropiskajos atvasinājumos, kas uzsver šī modeļa lietderību orgānu-specifisko metastāžu mehānismu izpētē. Kā šīs atzītās metastāžu sistēmas fluorescences marķējams analogs, 4T1-GFP nodrošina spēcīgu platformu kvantitatīviem metastāžu pētījumiem, terapeitiskās efektivitātes testēšanai, imūnonkoloģijas pētījumiem, kā arī audzēja šūnu izplatīšanās un kolonizācijas kinētikas analīzei in vivo.

Ģenētiskā modifikācija: stabili modificēts ar replikācijas nespējīgu lentivīrusa transdukciju, lai ekspresētu ZsGreen1 zaļās fluorescences proteīna reporteru; tiek uzturēts kā poliklonāla populācija puromicīna selekcijas apstākļos (1–5 µg/mL). S1/BSL-1 drošības līmenis.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu