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Cellules Lama-84
Tissu
Le sang
Maladie
Leucémie myéloïde chronique
Synonymes
LAMA-84, LAMA84, Lama84

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Cellules Lama-84

Cell line · Référence du produit 300261

LAMA-84 est une lignée cellulaire humaine issue du sang périphérique d'un patient atteint d'une leucémie myéloïde chronique (LMC) en crise blastique. Cette lignée cellulaire est caractérisée...

€430.00hors taxes et frais de port

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01Informations générales

Description

LAMA-84 est une lignée cellulaire humaine dérivée du sang périphérique d'un patient atteint de leucémie myéloïde chronique (LMC) en crise blastique. Cette lignée cellulaire est caractérisée par la présence du chromosome de Philadelphie, qui entraîne la fusion du gène BCR-ABL, caractéristique de la LMC. L'oncogène BCR-ABL est connu pour son rôle dans l'augmentation de l'activité tyrosine kinase, qui favorise diverses voies de signalisation conduisant à une prolifération cellulaire incontrôlée et à une résistance à l'apoptose. Les cellules LAMA-84 constituent donc un modèle inestimable pour l'étude des mécanismes moléculaires de la progression de la LMC et pour l'évaluation de l'efficacité des inhibiteurs de la tyrosine kinase (ITK) dans un cadre préclinique.

En recherche, LAMA-84 a été largement utilisé pour comprendre la biologie de la LMC, en particulier dans le contexte de la résistance aux médicaments et de l'évolution de la maladie. Les études portant sur cette lignée cellulaire ont permis d'élucider les réponses cellulaires à différentes générations d'inhibiteurs de la tyrosine kinase, comme l'imatinib, le dasatinib et le nilotinib. En outre, le LAMA-84 a contribué à la recherche de nouvelles stratégies thérapeutiques visant à surmonter la résistance aux TKI, y compris l'essai de thérapies combinées qui ciblent d'autres voies de signalisation affectées de manière synergique par la protéine de fusion BCR-ABL.

Tissu
Le sang
Maladie
Leucémie myéloïde chronique
Synonymes
  • LAMA-84
  • LAMA84
  • Lama84

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Suspension
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Cellules rondes
Temps de doublement
30 heures

04Identifiants

Référence
Lama-84 (numéro de catalogue Cytion 300261)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0388

05Expression et sensibilité

Antigènes de surface
GPIIb/IIIa+, GPIIIa+
Profil mutationnel
BCR-ABL1 pos
Virus
EBNA, EA et VCA n'ont pas été détectés

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS inactivé à la chaleur
Repiquage
Les cellules adhérant au fond du flacon de culture cellulaire peuvent être délogées par agitation. Maintenez les cultures en ajoutant ou en remplaçant périodiquement le milieu. Démarrez les cultures avec une densité de 5 x 105 cellules/ml et maintenez la concentration cellulaire dans une fourchette comprise entre 3 x 105 et 1 x 106 cellules/ml pour une croissance optimale.
Densité de semis
1 à 2 x 104 cellules/cm2
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
29 ans
Origine ethnique
Caucasien