01General information
- Description
LAMA-84 הוא קו תאים אנושי שמקורו בדם ההיקפי של חולה הסובל מלוקמיה מיאלואידית כרונית (CML) במשבר בלאסט. קו תאים זה מאופיין בנוכחות כרומוזום פילדלפיה, המביא ליצירת גן היתוך BCR-ABL, המאפיין את CML. הגנים האונקוגניים BCR-ABL ידועים בתפקידם בהגברת פעילות טירוזין קינאז, המקדמת מסלולי איתות שונים המובילים לשגשוג תאים בלתי מבוקר ועמידות לאפופטוזיס. תאי LAMA-84 מהווים אפוא מודל יקר ערך לחקר המנגנונים המולקולריים של התקדמות CML ולהערכת היעילות של מעכבי טירוזין קינאז (TKI) בסביבה פרה-קלינית.
במחקר, LAMA-84 שימש רבות להבנת הביולוגיה של CML, במיוחד בהקשר של עמידות לתרופות והתפתחות המחלה. מחקרים שבוצעו על קו תאים זה סייעו בהבהרת התגובות התאיות לדורות שונים של TKI, כגון אימטיניב, דאסאטיניב ונילוטיניב. יתר על כן, LAMA-84 תרם לחקר אסטרטגיות טיפוליות חדשות שמטרתן להתגבר על עמידות ל-TKI, כולל בדיקת טיפולים משולבים המכוונים למסלולי איתות אחרים המושפעים באופן סינרגטי מחלבון ה-BCR-ABL.
- Tissue
- דם
- Disease
- לוקמיה מיאלואידית כרונית
- Synonyms
- LAMA-84
- LAMA84
- Lama84
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- תאים עגולים
- Doubling time
- 30 שעות
04Identifiers
- Citation
- Lama-84 (מספר קטלוגי Cytion 300261)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0388
05Expression and susceptibility
- Surface antigens
- GPIIb/IIIa+, GPIIIa+
- Mutational profile
- BCR-ABL1 חיובי
- Viruses
- EBNA, EA ו-VCA לא אותרו
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS מנוטרל בחום
- Subculturing
- תאים הנצמדים לתחתית צלוחית התרבית ניתן לשחרר על ידי ניעור. יש לשמור על התרבית על ידי הוספה או החלפה תקופתית של המצע. יש להתחיל את התרבית בצפיפות של 5 x 105 תאים/מ"ל ולשמור על ריכוז התאים בטווח של 3 x 105 עד 1 x 106 תאים/מ"ל לצורך צמיחה מיטבית.
- Seeding density
- 1 עד 2 x 104 תאים/סמ"ר
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 29 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
