01General information
- Description
LAMA-84 es una línea celular humana derivada de la sangre periférica de un paciente con leucemia mieloide crónica (LMC) en crisis blástica. Esta línea celular se caracteriza por la presencia del cromosoma Filadelfia, que da lugar al gen de fusión BCR-ABL, un rasgo distintivo de la LMC. Se sabe que el oncogén BCR-ABL desempeña un papel en el aumento de la actividad de la tirosina quinasa, lo que promueve diversas vías de señalización que conducen a la proliferación celular descontrolada y a la resistencia a la apoptosis. Por lo tanto, las células LAMA-84 constituyen un modelo invaluable para estudiar los mecanismos moleculares de la progresión de la LMC y para evaluar la eficacia de los inhibidores de la tirosina quinasa (ITQ) en un entorno preclínico.
En la investigación, la línea celular LAMA-84 se ha utilizado ampliamente para comprender la biología de la LMC, especialmente en el contexto de la resistencia a los medicamentos y la evolución de la enfermedad. Los estudios con esta línea celular han ayudado a dilucidar las respuestas celulares a diferentes generaciones de TKI, como el imatinib, el dasatinib y el nilotinib. Además, LAMA-84 ha contribuido a la investigación de nuevas estrategias terapéuticas destinadas a superar la resistencia a los TKI, incluyendo la prueba de terapias combinadas que se dirigen a otras vías de señalización afectadas de manera sinérgica por la proteína de fusión BCR-ABL.
- Tissue
- Sangre
- Disease
- Leucemia mieloide crónica
- Synonyms
- LAMA-84
- LAMA84
- Lama84
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Células redondas
- Doubling time
- 30 horas
04Identifiers
- Citation
- Lama-84 (número de catálogo de Cytion 300261)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0388
05Expression and susceptibility
- Surface antigens
- GPIIb/IIIa+, GPIIIa+
- Mutational profile
- BCR-ABL1 positivo
- Viruses
- No se detectaron EBNA, EA ni VCA
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, con 2,0 mM de glutamina estable y 2,0 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion: 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de suero fetal bovino (FBS) inactivado por calor
- Subculturing
- Las células que se adhieren al fondo del frasco de cultivo celular pueden desprenderse al agitarlo. Mantenga los cultivos agregando o reemplazando el medio periódicamente. Inicie los cultivos con una densidad de 5 x 10⁵ células/ml y mantenga la concentración celular dentro del rango de 3 x 10⁵ a 1 x 10⁶ células/ml para un crecimiento óptimo.
- Seeding density
- De 1 a 2 × 10⁴ células/cm²
- Post-thaw recovery
- Después de descongelarlas, siembre las células a una densidad de 5 × 10⁴ células/cm² y deje que se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Donor age
- 29 años
- Ethnicity
- caucásico
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes