Przejdź do treści
Komórki Lama-84
Chusteczka
Krew
Choroba
Przewlekła białaczka szpikowa
Synonimy
LAMA-84, LAMA84, Lama84

Dokumenty

Komórki Lama-84

Cell line · Numer produktu 300261

LAMA-84 to ludzka linia komórkowa pochodząca z krwi obwodowej pacjenta z przewlekłą białaczką szpikową (CML) w fazie kryzysu blastycznego. Linia ta charakteryzuje się...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

LAMA-84 jest ludzką linią komórkową pochodzącą z krwi obwodowej pacjenta z przewlekłą białaczką szpikową (CML) w kryzysie blastycznym. Ta linia komórkowa charakteryzuje się obecnością chromosomu Philadelphia, co skutkuje genem fuzyjnym BCR-ABL, cechą charakterystyczną CML. Onkogen BCR-ABL jest znany ze swojej roli w zwiększaniu aktywności kinazy tyrozynowej, która promuje różne szlaki sygnałowe prowadzące do niekontrolowanej proliferacji komórek i oporności na apoptozę. Komórki LAMA-84 są zatem nieocenionym modelem do badania molekularnych mechanizmów progresji CML i oceny skuteczności inhibitorów kinazy tyrozynowej (TKI) w warunkach przedklinicznych.

W badaniach, LAMA-84 była szeroko wykorzystywana do zrozumienia biologii CML, szczególnie w kontekście oporności na leki i ewolucji choroby. Badania z udziałem tej linii komórkowej pomogły w wyjaśnieniu odpowiedzi komórkowej na różne generacje TKI, takie jak imatynib, dasatynib i nilotynib. Co więcej, LAMA-84 przyczyniła się do zbadania nowych strategii terapeutycznych mających na celu przezwyciężenie oporności na TKI, w tym testowania terapii skojarzonych, które są ukierunkowane na inne szlaki sygnałowe, na które synergistycznie wpływa białko fuzyjne BCR-ABL.

Chusteczka
Krew
Choroba
Przewlekła białaczka szpikowa
Synonimy
  • LAMA-84
  • LAMA84
  • Lama84

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Okrągłe komórki
Czas podwojenia
30 godzin

04Identyfikatory

Źródło
Lama-84 (numer katalogowy Cytion 300261)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0388

05Ekspresja i podatność

Antygeny powierzchniowe
GPIIb/IIIa+, GPIIIa+
Profil mutacji
BCR-ABL1 poz
Wirusy
EBNA, EA i VCA nie zostały wykryte

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS inaktywowanym termicznie
Hodowla komórek w subkulturze
Komórki przylegające do dna kolby do hodowli komórkowej można usunąć poprzez wstrząsanie. Hodowle należy utrzymywać poprzez okresowe dodawanie lub wymianę pożywki. Hodowle należy rozpocząć od gęstości 5 x 105 komórek/ml i utrzymywać stężenie komórek w zakresie od 3 x 105 do 1 x 106 komórek/ml, aby uzyskać optymalny wzrost.
Gęstość wysiewu
1 do 2 x 104 komórek/cm2
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
29 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski