Gå til innholdet
Lama-84-celler
Vev
Blod
Sykdom
Kronisk myeloid leukemi
Synonymer
LAMA-84, LAMA84, Lama84

Dokumenter

Lama-84-celler

Cell line · Produktnummer 300261

LAMA-84 er en menneskelig cellelinje som stammer fra perifert blod fra en pasient med kronisk myeloid leukemi (CML) i blastkrise. Denne cellelinjen er karakterisert...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

LAMA-84 er en human cellelinje som stammer fra perifert blod fra en pasient med kronisk myeloid leukemi (KML) i blastkrise. Denne cellelinjen kjennetegnes av tilstedeværelsen av Philadelphiakromosomet, som resulterer i fusjonsgenet BCR-ABL, et kjennetegn ved KML. BCR-ABL-onkogenet er kjent for sin rolle i å øke tyrosinkinaseaktiviteten, noe som fremmer ulike signalveier som fører til ukontrollert celleproliferasjon og resistens mot apoptose. LAMA-84-celler er derfor en uvurderlig modell for å studere de molekylære mekanismene bak utviklingen av KML og for å evaluere effekten av tyrosinkinasehemmere (TKI-er) i en preklinisk setting.

LAMA-84 har vært mye brukt i forskningen for å forstå KMLs biologi, spesielt i forbindelse med legemiddelresistens og sykdomsutvikling. Studier med denne cellelinjen har bidratt til å belyse den cellulære responsen på ulike generasjoner av TKI-er, som imatinib, dasatinib og nilotinib. LAMA-84 har dessuten bidratt til utforskningen av nye behandlingsstrategier for å overvinne TKI-resistens, inkludert testing av kombinasjonsbehandlinger som retter seg mot andre signalveier som påvirkes synergistisk av BCR-ABL-fusjonsproteinet.

Vev
Blod
Sykdom
Kronisk myeloid leukemi
Synonymer
  • LAMA-84
  • LAMA84
  • Lama84

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Oppheng
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Runde celler
Fordoblingstid
30 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Lama-84 (Cytion-katalognummer 300261)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0388

05Uttrykk og mottakelighet

Overflateantigener
GPIIb/IIIa+, GPIIIa+, GPIIIa
Mutasjonsprofil
BCR-ABL1 pos
Virus
EBNA, EA og VCA ble ikke påvist

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % varmeinaktivert FBS
Subkultivering
Celler som fester seg til bunnen av cellekulturflasken kan løsnes ved å riste. Oppretthold kulturene ved å tilsette eller skifte ut mediet med jevne mellomrom. Start kulturene med en tetthet på 5 x 105 celler/ml og hold cellekonsentrasjonen innenfor området 3 x 105 til 1 x 106 celler/ml for optimal vekst.
Såtetthet
1 til 2 x 104 celler/cm2
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
29 år
Etnisitet
Kaukasisk